Перейти до вмісту
CCK-81
Тканина
Метастатичний
Хвороба
Аденокарцинома товстої кишки
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
CCK81

Документи

CCK-81

Cell line · Номер товару 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія CCK-81 — це модель аденокарциноми товстої кишки людини, отримана з первинної пухлини. Вона широко використовується в дослідженнях з біології раку, що зосереджуються на злоякісних новоутвореннях шлунково-кишкового тракту, і була охарактеризована з точки зору різних генетичних мутацій та профілів реакції на лікарські препарати. Згідно з функціональним скринінгом генів-супресорів пухлин, CCK-81 експресує мутантний **TP53**, що підтверджено функціональними аналізами на основі дріжджів, причому лише близько 6% колоній демонструють транскрипційно активний фенотип p53, що вказує на мутацію з втратою функції. Цей мутаційний статус відповідає її пухлиногенному походженню та сприяє її значущості як моделі для вивчення колоректальних раків з дефіцитом p53.

CCK-81 також включено до основних збірників ліній ракових клітин, таких як Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), де його профіль було описано на рівні багатьох омічних шарів, включаючи експресію генів, варіацію кількості копій, статус мутацій та чутливість до ліків. Його включення до цих наборів даних дозволяє проводити інтегрований аналіз залежностей від сигнальних шляхів та терапевтичних вразливостей серед підтипів колоректального раку. Наприклад, протеогеномне профілювання показало, що клітинні лінії колоректального раку, включаючи CCK-81, часто демонструють порушення регуляції сигнальних шляхів, таких як Wnt/β-катенін та MAPK, що робить їх придатними для досліджень у галузі прецизійної онкології, спрямованих на ці осі.

Тканина
Метастатичний
Хвороба
Аденокарцинома товстої кишки
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
  • CCK81

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Час подвоєння
45 годин

04Ідентифікатори

Посилання
CCK-81 (номер у каталозі Cytion 305757)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_2873

05Експресія та сприйнятливість

Профіль мутацій
Мутація: FBXW7, проста, p.Arg465Cys (c.1393C>T), гетерозиготна (DepMap=ACH-000963).Мутація, PIK3CA, проста, p.Cys420Arg (c.1258T>C), гетерозиготна (DepMap=ACH-000963). Мутація, TP53, проста, p.Pro278His (c.833C>A), гетерозиготна

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10 % FBS, 1 % NEAA та 1 мМ піруват натрію
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Від 1 до 3 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
62 роки
Етнічна приналежність
Японський