Gå direkte til indholdet
CCK-81
Væv
Metastatisk
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen
Metastasested
Lymfeknude
Synonymer
CCK81

Dokumenter

CCK-81

Cell line · Varenummer 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

CCK-81-cellelinjen er en model for humant kolorektalt adenokarcinom, der stammer fra en primær tumor. Den anvendes ofte i kræftbiologiske undersøgelser med fokus på maligne lidelser i mave-tarmkanalen og er blevet karakteriseret med hensyn til forskellige genetiske ændringer og lægemiddelresponsprofiler. Ifølge funktionel screening af tumorsuppressorgener udtrykker CCK-81 mutant **TP53**, hvilket er bekræftet ved gærbaserede funktionelle assays, hvor kun ca. 6 % af kolonierne viser en transkriptionelt aktiv p53-fænotype, hvilket indikerer en funktionsnedsættende mutation. Denne mutationsstatus stemmer overens med dens tumorigeniske oprindelse og bidrager til dens relevans som model til undersøgelse af p53-defekte kolorektale kræftformer.

CCK-81 er også blevet inkluderet i større kompendier over kræftcellelinjer, såsom Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), hvor den er blevet profileret på tværs af flere omics-lag, herunder genekspression, variation i kopital, mutationsstatus og lægemiddelfølsomhed. Dens inkludering i disse datasæt muliggør integrerede analyser af afhængigheder i signalveje og terapeutiske sårbarheder på tværs af subtyper af kolorektal kræft. For eksempel har proteogenomisk profilering fremhævet, at kolorektale kræftcellelinjer, herunder CCK-81, ofte udviser dysregulerede signalveje såsom Wnt/β-catenin og MAPK, hvilket gør dem egnede til præcisionsonkologiske studier rettet mod disse akser.

Væv
Metastatisk
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen
Metastasested
Lymfeknude
Synonymer
  • CCK81

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Fordoblingstid
45 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CCK-81 (Cytion-katalognummer 305757)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: FBXW7, enkel, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozygot (DepMap=ACH-000963).Mutation, PIK3CA, enkel, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozygot (DepMap=ACH-000963).Mutation, TP53, enkel, p.Pro278His (c.833C>A), heterozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 10 % FBS, 1 % NEAA og 1 mM natriumpyruvat til mediet
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
62 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk