CFSC-8B

CFSC-8B е клонална линия от чернодробни звездовидни клетки (HSC) на плъхове, получена от циротична чернодробна тъкан, и представлява един от няколкото субклона, генерирани от спонтанно иммортализирани циротични клетки, натрупващи мазнини (CFSC). Родителската популация от CFSC е създадена от хепатоцити, изолирани от мъжки плъхове от породата Wistar с цироза на черния дроб, предизвикана от тетрахлорметан. След многократно пресаждане и градиентно пречистване, чрез ограничаващо разреждане са получени отделни клони, сред които е избран CFSC-8B и е характеризиран като стабилна, непрекъснато пролиферираща линия. Както е обобщено в раздела „NFSC, CFSC и производни“ на обзора (страница 709), CFSC-8B принадлежи към група клони на звездни клетки, произхождащи от цироза, които проявяват изразена клонална хетерогенност по отношение на пролиферацията и производството на екстрацелуларна матрица :contentReference[oaicite:0]{index=0}.

CFSC-8B проявява фенотип, подобен на този на миофибробластите, съответстващ на активирани чернодробни звездни клетки. Клетките са едноядрени, с фузиформена морфология и цитоплазма, богата на свободни рибозоми и изобилие от груб ендоплазмен ретикулум. Те експресират десмин и виментин и синтезират ключови компоненти на екстрацелуларния матрикс, включително колаген тип I и III, фибронектин и ламинин. В сравнение с клетъчните линии на звездните клетки, получени от нормален черен дроб (NFSC), клоновете на CFSC, получени от цироза, като CFSC-8B, съдържат по-малко липидни капчици и проявяват по-изразен фенотип на фибриларна екстрацелуларна матрица. Функционалните анализи са доказали реактивност към профиброгенни цитокини, включително трансформиращ растежен фактор-β, с индукция на експресията на гени за колаген, както и регулация на тъканния инхибитор на металопротеиназите-1 и други протеини, свързани с матрицата.

Благодарение на стабилния си активиран фенотип, силното производство на екстрацелуларна матрица и отзивчивостта към цитокини, CFSC-8B се използва широко като in vitro модел на трансдиференцирани хепатоцити в контекста на чернодробната фиброза. Въпреки това, както е обсъдено в обзора, иммортализираните линии на хепатоцитни звездисти клетки (HSC), включително производните на CFSC, проявяват генотипна и фенотипна дрейфа и не възпроизвеждат напълно динамичния преход от състояние на покой към активирано състояние, наблюдаван при първичните звездисти клетки :contentReference[oaicite:1]{index=1}. Следователно CFSC-8B е особено подходящ за механистични изследвания на фиброгенното сигнализиране, регулацията на екстрацелуларния матрикс и антифибротичните интервенции при условия, моделиращи установена активация на звездните клетки.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация