CFSC-8B

A CFSC-8B é uma linha clonal de células estreladas hepáticas (HSC) de rato, derivada de tecido hepático cirrótico, e representa um dos vários subclones gerados a partir de células cirróticas acumuladoras de gordura (CFSC) imortalizadas espontaneamente. A população parental de CFSC foi estabelecida a partir de células estreladas hepáticas isoladas de ratos Wistar machos com cirrose hepática induzida por tetracloreto de carbono. Após passagens repetidas e purificação por gradiente, foram obtidos clones individuais por diluição limitante, entre os quais a CFSC-8B foi selecionada e caracterizada como uma linha estável e em proliferação contínua. Conforme resumido na secção «NFSC, CFSC e derivados» da revisão (página 709), o CFSC-8B pertence a um grupo de clones de células estreladas derivadas da cirrose que apresentam uma heterogeneidade clonal pronunciada no que diz respeito à proliferação e à produção de matriz extracelular :contentReference[oaicite:0]{index=0}.

A CFSC-8B apresenta um fenótipo semelhante ao dos miofibroblastos, consistente com células estreladas hepáticas ativadas. As células são mononucleadas, com morfologia fusiforme e um citoplasma rico em ribossomas livres e com abundante retículo endoplasmático rugoso. Expressam desmina e vimentina e sintetizam componentes-chave da matriz extracelular, incluindo colagénio dos tipos I e III, fibronectina e laminina. Em comparação com as linhas celulares estreladas derivadas do fígado normal (NFSC), os clones CFSC derivados da cirrose, como o CFSC-8B, contêm menos gotículas lipídicas e apresentam um fenótipo de matriz extracelular fibrilar mais pronunciado. Análises funcionais demonstraram capacidade de resposta a citocinas profibrogénicas, incluindo o fator de crescimento transformador-β, com indução da expressão do gene do colagénio, bem como regulação do inibidor tecidular das metaloproteinases-1 e de outras proteínas associadas à matriz.

Devido ao seu fenótipo ativado estável, à produção robusta de matriz extracelular e à capacidade de resposta às citocinas, o CFSC-8B é amplamente utilizado como modelo in vitro de células estreladas hepáticas transdiferenciadas no contexto da fibrose hepática. No entanto, tal como discutido na revisão, as linhas de HSC imortalizadas, incluindo derivados de CFSC, apresentam deriva genotípica e fenotípica e não reproduzem na íntegra a transição dinâmica do estado quiescente para o estado ativado observada nas células estreladas primárias :contentReference[oaicite:1]{index=1}. Por conseguinte, o CFSC-8B é particularmente adequado para estudos mecanísticos da sinalização fibrogénica, da regulação da matriz extracelular e de intervenções antifibróticas em condições que simulam a ativação estabelecida das células estreladas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia