Mine otse sisu juurde
CFSC-8B
Kude
Maksa

Dokumendid

CFSC-8B

Cell line · Toote number 305471

CFSC-8B is a clonal rat hepatic stellate cell (HSC) line derived from cirrhotic liver tissue and represents one of several subclones generated from sponta...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CFSC-8B on klooniline roti maksa tähtrakkude (HSC) liin, mis on saadud tsirroosiga maksakudest ning kujutab endast üht mitmest subkloonist, mis on tekkinud spontaanselt immortalisatsioonile allunud tsirroosiga rasva ladustavatest rakkudest (CFSC). Algrühm CFSC loodi süsiniktetraklooriidiga indutseeritud maksatsirroosiga isas-Wistari rottidelt isoleeritud maksa tähtrakkudest. Pärast korduvat passaažimist ja gradiendipuhastamist saadi piiratud lahjendamise teel üksikud kloonid, mille hulgast valiti välja CFSC-8B ja iseloomustati seda stabiilse, pidevalt paljuneva liinina. Nagu on kokku võetud ülevaate jaotises „NFSC, CFSC ja derivaadid“ (lk 709), kuulub CFSC-8B tsirroosist pärinevate tähtrakukloonide rühma, mis ilmutavad märkimisväärset kloonilist heterogeensust proliferatsiooni ja ekstratsellulaarse maatriksi tootmise osas :contentReference[oaicite:0]{index=0}.

CFSC-8B-l on müofibroblastidele sarnane fenotüüp, mis vastab aktiveeritud maksa tähtrakkudele. Rakud on ühe tuumaga, fusiformse morfoloogiaga ning nende tsütoplasmas on rohkesti vabu ribosoome ja karedat endoplasmaatilist retikulumi. Need ekspresseerivad desmiini ja vimentiini ning sünteesivad peamisi ekstratsellulaarse maatriksi komponente, sealhulgas I- ja III-tüüpi kollageeni, fibronektiini ja laminiini. Võrreldes normaalse maksast pärinevate tähtrakkude liinidega (NFSC) sisaldavad tsirroosist pärinevad CFSC-kloonid, nagu CFSC-8B, vähem lipiiditilku ja neil on väljendunum fibrillaarne ekstratsellulaarse maatriksi fenotüüp. Funktsionaalsed analüüsid on näidanud vastuvõtlikkust profibrogeensetele tsütokiinidele, sealhulgas transformatiivse kasvufaktori β-le, millega kaasneb kollageeni geeniekspressiooni indutseerimine, samuti metalloproteinaaside inhibiitori-1 ja teiste maatriksiga seotud valkude regulatsioon.

Tänu oma stabiilsele aktiveeritud fenotüübile, tugevale ekstratsellulaarse maatriksi tootmisele ja tsütokiinidele reageerimisvõimele kasutatakse CFSC-8B-d laialdaselt transdiferentseerunud maksa tähtrakkude in vitro mudelina maksafibroosi kontekstis. Siiski, nagu ülevaates arutatud, ilmnevad immortaliseeritud HSC-liinidel, sealhulgas CFSC-derivaatidel, genotüübiline ja fenotüübiline triiv ning need ei kajasta täielikult primaarsetes tähtrakkudes täheldatud dünaamilist üleminekut puhkeolekust aktiveeritud olekusse :contentReference[oaicite:1]{index=1}. Seetõttu sobib CFSC-8B eriti hästi fibrogeneetilise signalisatsiooni, ekstratsellulaarse maatriksi regulatsiooni ja antifibrootiliste sekkumiste mehhanistlikeks uuringuteks tingimustes, mis modelleerivad väljakujunenud tähtrakkude aktiveerumist.

Kude
Maksa

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Maksatähtrakud

04Tunnused

Viide
CFSC-8B (Cytioni katalooginumber 305471)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_4U37

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud