CFSC-8B

La CFSC-8B è una linea clonale di cellule stellate epatiche (HSC) di ratto derivata da tessuto epatico cirrotico e rappresenta uno dei numerosi sottocloni generati da cellule cirrotiche ad accumulo di grasso (CFSC) immortalizzate spontaneamente. La popolazione parentale di CFSC è stata ottenuta da cellule stellate epatiche isolate da ratti Wistar maschi affetti da cirrosi epatica indotta dal tetracloruro di carbonio. A seguito di ripetuti passaggi e purificazione a gradiente, sono stati ottenuti singoli cloni mediante diluizione limitante; tra questi, CFSC-8B è stato selezionato e caratterizzato come una linea stabile e in continua proliferazione. Come riassunto nella sezione “NFSC, CFSC e derivati” della revisione (pagina 709), il CFSC-8B appartiene a un gruppo di cloni di cellule stellate derivati dalla cirrosi che mostrano una marcata eterogeneità clonale per quanto riguarda la proliferazione e la produzione di matrice extracellulare :contentReference[oaicite:0]{index=0}.

La CFSC-8B presenta un fenotipo simile a quello dei miofibroblasti, coerente con quello delle cellule stellate epatiche attivate. Le cellule sono mononucleate, con morfologia fusiforme e un citoplasma ricco di ribosomi liberi e abbondante reticolo endoplasmatico rugoso. Esprimono desmina e vimentina e sintetizzano componenti chiave della matrice extracellulare, tra cui i collageni di tipo I e III, la fibronectina e la laminina. Rispetto alle linee cellulari stellate derivate dal fegato normale (NFSC), i cloni CFSC derivati dalla cirrosi, come il CFSC-8B, contengono un minor numero di goccioline lipidiche e mostrano un fenotipo della matrice extracellulare fibrillare più pronunciato. Le analisi funzionali hanno dimostrato una risposta alle citochine profibrogeniche, tra cui il fattore di crescita trasformante β (TGF-β), con induzione dell’espressione genica del collagene, nonché la regolazione dell’inibitore tissutale delle metalloproteinasi-1 (TIMP-1) e di altre proteine associate alla matrice.

Grazie al suo fenotipo attivato stabile, alla robusta produzione di matrice extracellulare e alla reattività alle citochine, la CFSC-8B è ampiamente utilizzata come modello in vitro di cellule stellate epatiche transdifferenziate nel contesto della fibrosi epatica. Tuttavia, come discusso nella revisione, le linee di HSC immortalizzate, compresi i derivati delle CFSC, mostrano una deriva genotipica e fenotipica e non riproducono pienamente la transizione dinamica dallo stato quiescente a quello attivato osservata nelle cellule stellate primarie :contentReference[oaicite:1]{index=1}. Pertanto, la linea CFSC-8B è particolarmente adatta per studi meccanicistici sulla segnalazione fibrogenica, sulla regolazione della matrice extracellulare e sugli interventi antifibrotici in condizioni che riproducono l’attivazione consolidata delle cellule stellate.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia