Prejsť na obsah
CFSC-8B
Tkanivo
Pečeň

Dokumenty

CFSC-8B

Cell line · Číslo výrobku 305471

CFSC-8B is a clonal rat hepatic stellate cell (HSC) line derived from cirrhotic liver tissue and represents one of several subclones generated from sponta...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

CFSC-8B je klonálna línia pečeňových hviezdicových buniek (HSC) potkanov, odvodená z cirhotického pečeňového tkaniva, a predstavuje jeden z viacerých subklonov vytvorených zo spontánne imortalizovaných cirhotických buniek ukladajúcich tuk (CFSC). Pôvodná populácia CFSC bola vytvorená z pečeňových hviezdicových buniek izolovaných z samcov potkanov Wistar s cirhózou pečene vyvolanou tetrachlórmetánom. Po opakovanom pasážovaní a gradientovej purifikácii boli metódou limitného riedenia získané jednotlivé klony, z ktorých bol vybraný CFSC-8B a charakterizovaný ako stabilná, nepretržite proliferujúca línia. Ako je zhrnuté v časti „NFSC, CFSC a deriváty“ tohto prehľadu (strana 709), CFSC-8B patrí do skupiny klonov hviezdicových buniek odvodených z cirhózy, ktoré vykazujú výraznú klonálnu heterogenitu, pokiaľ ide o proliferáciu a produkciu extracelulárnej matice :contentReference[oaicite:0]{index=0}.

CFSC-8B vykazuje fenotyp podobný myofibroblastom, čo zodpovedá aktivovaným pečeňovým hviezdicovým bunkám. Bunky sú jednobunkové s vretenovitou morfológiou a cytoplazmou bohatou na voľné ribozómy a hojným drsným endoplazmatickým retikulom. Exprimujú desmín a vimentín a syntetizujú kľúčové zložky extracelulárnej matice, vrátane kolagénu typu I a III, fibronektínu a laminínu. V porovnaní s hviezdicovými bunkovými líniami odvodenými z normálnej pečene (NFSC) obsahujú klony CFSC odvodené z cirhózy, ako je CFSC-8B, menej lipidových kvapôčok a vykazujú výraznejší fenotyp fibrilárnej extracelulárnej matice. Funkčné analýzy preukázali citlivosť na profibrogénne cytokíny, vrátane transformujúceho rastového faktora β, s indukciou expresie génov kolagénu, ako aj reguláciu tkanivového inhibítora metaloproteáz-1 a iných proteínov spojených s matricou.

Vďaka svojmu stabilnému aktivovanému fenotypu, silnej produkcii extracelulárnej matice a citlivosti na cytokíny sa CFSC-8B široko používa ako in vitro model transdiferencovaných pečeňových hviezdicových buniek v kontexte pečeňovej fibrózy. Ako sa však uvádza v prehľade, imortalizované línie HSC vrátane derivátov CFSC vykazujú genotypovú a fenotypovú drift a úplne nezachytávajú dynamický prechod z kľudového do aktivovaného stavu pozorovaný v primárnych hviezdicových bunkách :contentReference[oaicite:1]{index=1}. Preto je CFSC-8B obzvlášť vhodný na mechanistické štúdie fibrogénnej signalizácie, regulácie extracelulárnej matice a antifibrotických intervencií za podmienok modelujúcich etablovanú aktiváciu hviezdicových buniek.

Tkanivo
Pečeň

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
Pečeňová hviezdicová bunka

04Identifikátory

Citácia
CFSC-8B (katalógové číslo Cytion 305471)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4U37

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Dospelí