Přejít na obsah
HEK293-TACD2
Tkáň
Fetální ledvina
Nemoc
Transformované/imortalizované; netumorogenní (na pozadí HEK293)

Dokumenty

HEK293-TACD2

Cell line · Číslo výrobku 305424

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty platí ceny...

€1,900.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty činí cena přibližně 6 250 EUR.
Pokud zastupujete komerční subjekt nebo si nejste jisti, do které kategorie spadáte, prosím nás kontaktujte.


Buněčná linie HEK293-TACD2 je stabilní rekombinantní buněčná linie HEK293, která byla geneticky upravena tak, aby exprimovala receptor TACD2 na středně vysoké úrovni, přibližně 10 000 molekul na buňku. Tato buněčná linie byla vyvinuta pomocí technologie „landing pad“ společnosti inscreenex, která zajišťuje přesnou a reprodukovatelnou integraci genu TACD2 na specifickém, předem ověřeném genomovém lokusu. TACD2, známý také jako TROP2 nebo GA733-1, je nádorově asociovaný transdukční faktor vápníku, který hraje klíčovou roli v intracelulární vápníkové signalizaci, která je zásadní pro buněčné procesy, jako je růst, dělení a diferenciace. Nadměrná exprese TACD2 byla pozorována u různých karcinomů, včetně kolorektálního, žaludečního a pankreatického karcinomu, což z něj činí významný cíl pro konjugáty protilátek a léčiv a imunoterapii.

Exprese TACD2 v této buněčné linii byla potvrzena pomocí průtokové cytometrie s protilátkou specifickou pro cíl, což zajistilo spolehlivou a konzistentní hustotu receptorů v celé buněčné populaci.

Tkáň
Fetální ledvina
Nemoc
Transformované/imortalizované; netumorogenní (na pozadí HEK293)
Aplikace
Vývoj protilátek a ADC zaměřených na TROP2 (TACD2/TACSTD2) (analogy sacituzumabu govitecanu); výzkum trojnásobně negativního karcinomu prsu, plic a uroteliálního karcinomu; testy ADCC/CDC; průtoková cytometrie

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HEK293 line contains a TACD2 expression construct for receptor-binding and functional analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky
Doba zdvojnásobení
cca 24–36 hodin

04Identifikátory

Citace
HEK293-TACD2 (katalogové číslo Cytion 305424)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6G29

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
TACD2 (TROP2 nebo GA733-1)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Médium doplňte 10% FBS, 1 mM pyruvátem sodným, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Přidejte geneticin (G418-Sulfat), abyste dosáhli konečné koncentrace 1 mg/ml.
Disociační činidlo
Trypsin-EDTA
Subkultivace
Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte odpovídající objem roztoku trypsinu/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C, dokud se buňky neoddělí (5-10 minut). Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení

Po rozmrazení rozdělte buňky v poměru 1:2 až 1:3 do baněk T25 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazování a přilnout.

Pro co nejlepší přilnutí a životaschopnost buněk po rozmrazení doporučujeme pro počáteční nasazení po kryozotavení použít baňky nebo destičky potažené kolagenem. Pro následnou běžnou kultivaci buněk není kolagenový povlak nutný.

Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Plod