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HCCC-9810
Gewebe
Leber
Krankheit
Cholangiokarzinom
Synonyme
HCCC9810, Hccc9810

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HCCC-9810

Cell line · Artikelnummer 305476

Die Zelllinie HCCC-9810 stammt aus einem humanen intrahepatischen Cholangiokarzinom (iCCA), einem hochaggressiven Krebs, der seinen Ursprung im Epithel der Gallenwege hat...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie HCCC-9810 stammt aus einem humanen intrahepatischen Cholangiokarzinom (iCCA), einem hochaggressiven Krebs, der im Gallengangsepithel entsteht. Diese Zelllinie wurde intensiv genutzt, um die molekularen und zellulären Mechanismen zu untersuchen, die der Progression des Cholangiokarzinoms und dem Ansprechen auf die Behandlung zugrunde liegen. Ein wichtiger Schwerpunkt der Forschung an HCCC-9810-Zellen war deren Reaktion auf verschiedene Modulatoren von Signalwegen. So ist beispielsweise der PI3K/AKT/mTOR-Signalweg, der eine entscheidende Rolle bei der Zellproliferation, -migration und -invasion spielt, an der Pathogenese des iCCA beteiligt und kann als Zielmolekül genutzt werden, um das Tumorwachstum potenziell zu reduzieren.

Studien haben gezeigt, dass die HCCC-9810-Zelllinie Eigenschaften aufweist, die die Erforschung therapeutischer Ansätze unterstützen, darunter die Rolle der Doublecortin-ähnlichen Kinase 1 (DCLK1) bei der Förderung tumorigenischer Verhaltensweisen wie der epithelio-mesenchymalen Transition (EMT). Die Hemmung dieses Signalwegs, wie sie durch die Verabreichung spezifischer PI3K/AKT/mTOR-Inhibitoren beobachtet wurde, kann die Zellproliferation, Invasion und EMT-Prozesse in HCCC-9810-Zellen unterdrücken. Darüber hinaus haben Untersuchungen zu den Wechselwirkungen zwischen mesenchymalen Stammzellen und HCCC-9810 gezeigt, dass konditionierte Kulturmedien aus aus der menschlichen Nabelschnur gewonnenen mesenchymalen Stammzellen (hUC-MSCs) das Wachstum dieser Krebszellen hemmen können, indem sie Apoptose induzieren und die Proliferationsfähigkeit verringern, was teilweise durch die Modulation der Wnt/β-Catenin- und PI3K/Akt-Signalwege vermittelt wird.

Gewebe
Leber
Krankheit
Cholangiokarzinom
Synonyme
  • HCCC9810
  • Hccc9810

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
HCCC-9810 (Cytion-Katalognummer 305476)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_6908

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Chinesisch