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HCCC-9810
Tessuto
Fegato
Malattia
Colangiocarcinoma
Sinonimi
HCCC9810, Hccc9810

Documenti

HCCC-9810

Cell line · Codice prodotto 305476

La linea cellulare HCCC-9810 deriva da un colangiocarcinoma intraepatico umano (iCCA), un tumore altamente aggressivo che ha origine nell'epitelio biliare...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HCCC-9810 deriva dal colangiocarcinoma intraepatico umano (iCCA), un tumore altamente aggressivo che ha origine nell’epitelio biliare. Questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata per studiare i meccanismi molecolari e cellulari alla base della progressione del colangiocarcinoma e della risposta al trattamento. Un importante ambito di ricerca che coinvolge le cellule HCCC-9810 è stato quello della loro risposta a vari modulatori delle vie di segnalazione. Ad esempio, la via PI3K/AKT/mTOR, che svolge un ruolo cruciale nella proliferazione, migrazione e invasione cellulare, è implicata nella patogenesi dell’iCCA e può essere presa di mira per ridurre potenzialmente la crescita tumorale.

Gli studi hanno dimostrato che la linea cellulare HCCC-9810 presenta caratteristiche che favoriscono la ricerca di approcci terapeutici, compreso il ruolo della chinasi 1 simile alla doublecortina (DCLK1) nella promozione di comportamenti tumorigenici quali la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT). L’inibizione di questa via, come osservato attraverso la somministrazione di specifici inibitori PI3K/AKT/mTOR, può sopprimere la proliferazione cellulare, l’invasione e i processi di EMT nelle cellule HCCC-9810. Inoltre, studi sulle interazioni tra le cellule staminali mesenchimali e la linea HCCC-9810 hanno rivelato che i terreni di coltura condizionati provenienti da cellule staminali mesenchimali derivate dal cordone ombelicale umano (hUC-MSC) siano in grado di inibire la crescita di queste cellule tumorali inducendo l’apoptosi e riducendone la capacità proliferativa, in parte grazie alla modulazione delle vie di segnalazione Wnt/β-catenina e PI3K/Akt.

Tessuto
Fegato
Malattia
Colangiocarcinoma
Sinonimi
  • HCCC9810
  • Hccc9810

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HCCC-9810 (codice catalogo Cytion 305476)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6908

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Non specificato
Etnia
Cinese