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LA795
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom des Lungensystems der Maus
Synonyme
LA-795

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LA795

Cell line · Artikelnummer 300472

Die aus einem Lungenadenokarzinom stammende Zelllinie LA795 wurde hinsichtlich ihrer Chromosomenmuster unter Verwendung von G- und C-Banding-Verfahren bei pas...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie LA795, die von einem Lungenadenokarzinom stammt, wurde mit Hilfe von G- und C-Banding-Techniken bei den Passagen 60 und 100 eingehend auf ihre chromosomalen Muster untersucht. Die Chromosomenanalyse ergab die Modellchromosomenzahlen 69, 68, 67 und 66. Detaillierte G-Banding-Analysen von 46 Zellen dieser vier Klone zeigten, dass die Chromosomenmuster von LA795 hypotetraploide männliche Zellen sind, die denen von Zellen, die in Mäuse transplantiert wurden, stark ähneln. Die beiden primären Konfigurationen des 69er Modellchromosoms, die als 69I und 69II bezeichnet werden, deuten auf eine Progression in der chromosomalen Evolution von 69 zu 68, 67 und 66 hin, wie sie durch die Karyotyp-Analyse festgestellt wurde.

Die Karyotyp-Analyse zeigte auch ein bemerkenswertes Muster im Verlust bestimmter Chromosomen, insbesondere der Chromosomen Nr. 4 und Nr. 14, in den verschiedenen Klonen. Dieser wiederkehrende Chromosomenverlust deutet auf eine mögliche nicht zufällige Chromosomenaberration hin, die mit den Tumorzellen der Maus in Verbindung gebracht wird. Die Ergebnisse dieser Studien liefern wertvolle Einblicke in die chromosomale Stabilität und Evolution der LA795-Zelllinie und ermöglichen ein tieferes Verständnis der genetischen Grundlagen des Lungenadenokarzinoms und seiner Progression.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom des Lungensystems der Maus
Synonyme
  • LA-795

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
LA795 (Cytion Katalognummer 300472)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_G363

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Rasse / Unterart
T739
Alter des Spenders
Nicht spezifiziert