Mine otse sisu juurde
LA795
Kude
Kopsud
Haigus
Hiire kopsusüsteemi adenokartsinoom
Sünonüümid
LA-795

Dokumendid

LA795

Cell line · Toote number 300472

Kopsu adenokartsinoomist pärinevat rakuliini LA795 on põhjalikult uuritud selle kromosoomimustrite osas, kasutades G- ja C-värvimismeetodeid...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Kopsu adenokartsinoomist saadud LA795 rakuliini kromosoomimustreid on põhjalikult uuritud, kasutades G- ja C-ribade meetodit 60. ja 100. astme juures. Kromosoomianalüüs näitas mudelkromosoomide numbreid 69, 68, 67 ja 66. Nende nelja klooni 46 raku üksikasjalik G-ribade analüüs näitas, et LA795 kromosoomimustrid on hüpotetraploidsed isasrakud, mis sarnanevad lähedalt hiirtele siirdatud rakkude puhul täheldatuga. Karyotüübi analüüsi abil tuvastatud 69 mudelkromosoomi kaks primaarset konfiguratsiooni, mida nimetatakse 69I ja 69II, viitavad kromosoomi evolutsiooni arengule 69-st 68-ni, 67-ni ja 66-ni.

Karüotüüpide analüüs tõi esile ka märkimisväärse mustri konkreetsete kromosoomide, eriti kromosoomi nr 4 ja nr 14, kadumise osas erinevates kloonides. See korduv kromosoomikaotus viitab hiirte kasvajarakkudega seotud võimalikule mittejuhuslikule kromosoomiaberratsioonile. Nende uuringute tulemused annavad väärtusliku ülevaate LA795 rakuliini kromosoomide stabiilsusest ja evolutsioonist, võimaldades sügavamat arusaamist kopsu adenokartsinoomi geneetilistest alustest ja selle progresseerumisest.

Kude
Kopsud
Haigus
Hiire kopsusüsteemi adenokartsinoom
Sünonüümid
  • LA-795

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
LA795 (Cytioni katalooginumber 300472)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_G363

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Tõug / alamliik
T739
Doonori vanus
Täpsustamata