Siirry sisältöön
LA795
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Hiiren keuhkojen adenokarsinooma
Synonyymit
LA-795

Asiakirjat

LA795

Cell line · Tuotenumero 300472

Keuhkojen adenokarsinoomasta peräisin olevaa LA795-solulinjaa on tutkittu laajasti sen kromosomirakenteen osalta käyttäen G- ja C-värjäystekniikoita...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Keuhkojen adenokarsinoomasta peräisin olevaa LA795-solulinjaa on tutkittu laajasti sen kromosomimallien osalta käyttäen G- ja C-kaistatekniikoita 60- ja 100-vaiheissa. Kromosomianalyysi paljasti mallikromosominumerot 69, 68, 67 ja 66. Näiden neljän kloonin 46 solun yksityiskohtainen G-kaistoitusanalyysi osoitti, että LA795:n kromosomikuviot ovat hypotetraploideja urossoluja, jotka muistuttavat läheisesti hiiriin siirretyissä soluissa havaittuja kuvioita. Malli-kromosomin 69 kaksi ensisijaista konfiguraatiota, jotka on nimetty 69I:ksi ja 69II:ksi, viittaavat karyotyyppianalyysin avulla tunnistettuun kromosomikehityksen etenemiseen 69:stä 68:aan, 67:ään ja 66:een.

Karyotyyppianalyysi toi esiin myös huomattavan mallin tiettyjen kromosomien, erityisesti kromosomien nro 4 ja nro 14, häviämisessä eri kloonien välillä. Tämä toistuva kromosomikato viittaa hiiren kasvainsoluihin mahdollisesti liittyvään ei-sattumanvaraiseen kromosomipoikkeavuuteen. Näistä tutkimuksista saadut havainnot tarjoavat arvokasta tietoa LA795-solulinjan kromosomistabiilisuudesta ja evoluutiosta, mikä antaa syvällisemmän käsityksen keuhkojen adenokarsinooman ja sen etenemisen geneettisestä perustasta.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Hiiren keuhkojen adenokarsinooma
Synonyymit
  • LA-795

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
LA795 (Cytionin luettelonumero 300472)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_G363

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Rotua / alalajia
T739
Luovuttajan ikä
Määrittelemätön