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HMY-1
Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Metastasenherd
Linker Leistenlymphknoten
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HMY1

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HMY-1

Cell line · Artikelnummer 305145

The HMY-1 cell line is a malignant melanoma cell line derived from a human male patient. The melanoma originated on the right sole of the patient and late...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie HMY-1 ist eine Zelllinie eines malignen Melanoms, das von einem männlichen Patienten stammt. Das Melanom hatte seinen Ursprung an der rechten Fußsohle des Patienten und metastasierte später in die Lymphknoten. Die Zellen weisen eine fibroblastenähnliche Morphologie auf, die charakteristisch für Melanomzellen ist, die für die In-vitro-Kultur geeignet sind. Anfänglich wies die Zelllinie eine Pigmentierung auf, die bei Melanomen häufig vorkommt, die jedoch mit zunehmender Etablierung der Zelllinie abnahm und sich mit der Zeit stabilisierte.

Genetisch gesehen hat die HMY-1-Zelllinie eine modale Chromosomenzahl von 66, was auf erhebliche Chromosomenanomalien hinweist, die für Krebszellen typisch sind. Die Zelllinie weist eine unendliche Lebensdauer in der Kultur auf und ist damit ein wertvolles Modell für Langzeitstudien zur Biologie des Melanoms, zur Metastasierung und zu therapeutischen Eingriffen. Wie auch andere Melanomzelllinien kann HMY-1 für die Erforschung der Mechanismen der Melanomprogression, der Arzneimittelresistenz und der Entwicklung neuer Behandlungen für metastasierende Krebszellen eingesetzt werden.

Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Metastasenherd
Linker Leistenlymphknoten
Synonyme
  • HMY1

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Tumorauslösend
Ja
Verdopplungszeit
37 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
HMY-1 (Cytion-Katalognummer 305145)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2950

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
62 Jahre