Prejsť na obsah
HMY-1
Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Ľavá inguinálna lymfatická uzlina
Synonymá
HMY1

Dokumenty

HMY-1

Cell line · Číslo výrobku 305145

The HMY-1 cell line is a malignant melanoma cell line derived from a human male patient. The melanoma originated on the right sole of the patient and late...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HMY-1 je bunková línia malígneho melanómu odvodená od ľudského mužského pacienta. Melanóm vznikol na pravom chodidle pacienta a neskôr metastázoval do lymfatických uzlín. Bunky vykazujú morfológiu podobnú fibroblastom, ktorá je charakteristická pre melanómové bunky prispôsobené na kultiváciu in vitro. Spočiatku bunková línia vykazovala pigmentáciu, čo je bežná vlastnosť melanómov, ale táto pigmentácia sa časom vytratila, keď sa bunková línia etablovala a stabilizovala.

Z genetického hľadiska má bunková línia HMY-1 modálne číslo chromozómov 66, čo naznačuje významné chromozómové abnormality typické pre rakovinové bunky. Bunková línia vykazuje nekonečnú životnosť v kultúre, čím poskytuje cenný model pre dlhodobé štúdie biológie melanómu, metastázovania a terapeutických zásahov. Podobne ako iné melanómové bunkové línie, aj HMY-1 možno využiť na výskum mechanizmov progresie melanómu, rezistencie na lieky a na vývoj nových liečebných postupov zameraných na metastatické rakovinové bunky.

Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Ľavá inguinálna lymfatická uzlina
Synonymá
  • HMY1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Tumorigenický
Áno
Doba zdvojnásobenia
37 hodín

04Identifikátory

Citácia
HMY-1 (katalógové číslo Cytion 305145)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2950

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
62 rokov