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HMY-1
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sito metastatico
Linfonodo inguinale sinistro
Sinonimi
HMY1

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HMY-1

Cell line · Codice prodotto 305145

The HMY-1 cell line is a malignant melanoma cell line derived from a human male patient. The melanoma originated on the right sole of the patient and late...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HMY-1 è una linea cellulare di melanoma maligno derivata da un paziente umano di sesso maschile. Il melanoma ha avuto origine sulla pianta del piede destro del paziente e successivamente ha metastatizzato ai linfonodi. Le cellule presentano una morfologia simile a quella dei fibroblasti, caratteristica delle cellule di melanoma adattate alla coltura in vitro. Inizialmente, la linea cellulare presentava una pigmentazione, un tratto comune nei melanomi, ma questa pigmentazione si è attenuata con l'affermarsi della linea cellulare e si è stabilizzata nel tempo.

Dal punto di vista genetico, la linea cellulare HMY-1 ha un numero cromosomico modale di 66, che indica significative anomalie cromosomiche tipiche delle cellule tumorali. La linea cellulare dimostra una durata di vita infinita in coltura, fornendo un modello prezioso per studi a lungo termine sulla biologia del melanoma, sulle metastasi e sugli interventi terapeutici. Come altre linee cellulari di melanoma, HMY-1 può essere utilizzata per ricerche sui meccanismi di progressione del melanoma, sulla resistenza ai farmaci e sullo sviluppo di nuovi trattamenti mirati alle cellule tumorali metastatiche.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sito metastatico
Linfonodo inguinale sinistro
Sinonimi
  • HMY1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì
Tempo di raddoppio
37 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HMY-1 (numero di catalogo Cytion 305145)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2950

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
62 anni