Siirry sisältöön
HMY-1
Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Metastaasikohde
Vasen nivusimusolmuke
Synonyymit
HMY1

Asiakirjat

HMY-1

Cell line · Tuotenumero 305145

The HMY-1 cell line is a malignant melanoma cell line derived from a human male patient. The melanoma originated on the right sole of the patient and late...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HMY-1-solulinja on pahanlaatuinen melanoomasolulinja, joka on peräisin miespuolisesta ihmispotilaasta. Melanooma oli saanut alkunsa potilaan oikeasta jalkapohjasta, ja se oli myöhemmin levinnyt imusolmukkeisiin. Soluilla on fibroblastien kaltainen morfologia, joka on ominaista in vitro -viljelyyn soveltuville melanoomasoluille. Solulinjalla oli aluksi pigmentoitumista, joka on yleinen piirre melanoomissa, mutta pigmentoituminen hävisi solulinjan vakiintuessa ja vakiintui ajan myötä.

Geneettisesti HMY-1-solulinjan modaalinen kromosomiluku on 66, mikä viittaa syöpäsoluille tyypillisiin merkittäviin kromosomipoikkeavuuksiin. Solulinjalla on ääretön elinikä viljelyssä, mikä tarjoaa arvokkaan mallin melanooman biologian, etäpesäkkeiden ja terapeuttisten toimenpiteiden pitkäaikaistutkimuksiin. Kuten muitakin melanoomasolulinjoja, HMY-1:tä voidaan hyödyntää melanooman etenemismekanismien, lääkeresistenssin ja metastaattisiin syöpäsoluihin kohdistuvien uusien hoitomuotojen kehittämisessä.

Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Metastaasikohde
Vasen nivusimusolmuke
Synonyymit
  • HMY1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä
Kaksinkertaistumisaika
37 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HMY-1 (Cytionin tuotenumero 305145)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2950

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
62 vuotta