Mine otse sisu juurde
HMY-1
Kude
Nahk
Haigus
Melanoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne lümfisõlm
Sünonüümid
HMY1

Dokumendid

HMY-1

Cell line · Toote number 305145

The HMY-1 cell line is a malignant melanoma cell line derived from a human male patient. The melanoma originated on the right sole of the patient and late...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HMY-1 rakuliin on pahaloomulise melanoomi rakuliin, mis on saadud meessoost patsiendilt. Melanoom sai alguse patsiendi paremast tallaosast ja metastasiseerus hiljem lümfisõlmedesse. Rakkudel on fibroblastilaadne morfoloogia, mis on iseloomulik in vitro kasvatamiseks kohandatud melanoomirakkudele. Esialgu oli rakuliinil pigmentatsioon, mis on melanoomide puhul tavaline tunnus, kuid see pigmentatsioon hääbus, kui rakuliin kujunes ja stabiliseerus aja jooksul.

Geneetiliselt on HMY-1 rakuliini modaalne kromosoomide arv 66, mis näitab vähirakkudele iseloomulikke olulisi kromosoomianomaaliaid. Rakuliinil on kultuuris lõpmatu eluiga, mis annab väärtusliku mudeli melanoomi bioloogia, metastaaside ja terapeutiliste sekkumiste pikaajalisteks uuringuteks. Nagu ka teisi melanoomi rakuliine, saab HMY-1 kasutada melanoomi progresseerumise mehhanismide, ravimresistentsuse ja metastaatiliste vähirakkude vastu suunatud uudsete ravimeetodite väljatöötamiseks.

Kude
Nahk
Haigus
Melanoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne lümfisõlm
Sünonüümid
  • HMY1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah
Kahekordistumisaeg
37 tundi

04Tunnused

Viide
HMY-1 (Cytioni katalooginumber 305145)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2950

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
62 aastat