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MG-63
Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Metastasenherd
Knochen, linker Oberschenkelknochen
Synonyme
M-G63, MG63

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MG-63

Cell line · Artikelnummer 300441

MG-63 cells, a human osteosarcoma cell line derived from the bone of a 14-year-old White male patient with osteosarcoma, are a pivotal model in bone biolo...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MG-63-Zellen, eine menschliche Osteosarkom-Zelllinie, die aus dem Knochen eines 14-jährigen weißen männlichen Patienten mit Osteosarkom gewonnen wurde, sind ein zentrales Modell in der Knochenbiologieforschung. Die menschlichen Osteosarkomzellen MG63 mit ihrer Fibroblastenmorphologie und ihrer schnellen Proliferation sind ein wichtiges Instrument zum Verständnis des Knochenstoffwechsels, insbesondere im Zusammenhang mit Osteosarkomen.

MG-63-Zellen produzieren hohe Mengen an menschlichem Interferon, wenn sie mit Wirkstoffen wie Polyinosinsäure-Polycytidylsäure, Cycloheximid und Actinomycin D angeregt werden. Die erhöhte Interferonproduktion ist entscheidend für Studien, die sich mit den Immunreaktionen innerhalb der Knochenmikroumgebung beschäftigen.

Die Aussaat von MG-63-Zellen auf biokompatiblen Oberflächen wie Bioglasscheiben, Titanscheiben (Ti-6Al-4V) und Kobalt-Chrom-Legierungen (Co-Cr-Mo) ist aufgrund ihrer starken Zelladhäsion und -anhaftung möglich. Sie sind ein gutes osteoblastisches Modell für die Untersuchung der Osseointegration und der Wechselwirkungen zwischen Knochenzellen und Implantaten mit amorphen Kohlenstofffilmen und Tantal-Verbundwerkstoffen.

Die Forschung mit der osteoblastischen Zelllinie MG-63 konzentriert sich häufig auf Apoptose, die Regulierung und Expression von Osteocalcin und die Auswirkungen von Adenosin auf den Knochenstoffwechsel.

Insgesamt bleiben die MG-63-Zellen ein Eckpfeiler in der Erforschung menschlicher osteoblastenähnlicher Zellen, da sie Einblicke in das Zellwachstum, die Differenzierung und die komplizierten Wechselwirkungen zwischen Knochenzellen und ihrer Mikroumgebung bieten.

Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Metastasenherd
Knochen, linker Oberschenkelknochen
Synonyme
  • M-G63
  • MG63

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
MG-63 (Cytion-Katalognummer 300441)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0426

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Transformierender Wachstumsfaktor beta (TGF beta, Typ I und Typ II)
Produkte
Interferon

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
14 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch