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MG-63
Tessuto
Osso
Malattia
Osteosarcoma
Sito metastatico
Osso, femore sinistro
Sinonimi
M-G63, MG63

Documenti

MG-63

Cell line · Codice prodotto 300441

MG-63 cells, a human osteosarcoma cell line derived from the bone of a 14-year-old White male patient with osteosarcoma, are a pivotal model in bone biolo...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule MG-63, una linea cellulare di osteosarcoma umano derivata dall'osso di un paziente maschio bianco di 14 anni affetto da osteosarcoma, sono un modello fondamentale nella ricerca sulla biologia ossea. Le cellule di osteosarcoma umano MG63, con la loro morfologia di fibroblasti e la loro rapida proliferazione, sono uno strumento essenziale per la comprensione del metabolismo osseo, in particolare nel contesto dell'osteosarcoma.

Le cellule MG-63 producono alti livelli di interferone umano quando vengono indotte con agenti come l'acido polinosinico-policitidico, la cicloeximide e l'actinomicina D. L'aumento della produzione di interferone è fondamentale per gli studi che si concentrano sulle risposte immunitarie all'interno del microambiente osseo.

La semina di cellule MG-63 su superfici biocompatibili come i dischi di Bioglass, i dischi di titanio (Ti-6Al-4V) e le leghe di cromo-cobalto (Co-Cr-Mo) è possibile grazie alla loro forte aderenza e attaccamento alle cellule. Sono un buon modello osteoblastico per studiare l'osteointegrazione e le interazioni cellula ossea-impianto con film di carbonio amorfo e tantalio composito.

La ricerca che coinvolge la linea cellulare osteoblastica MG-63 si concentra spesso sull'apoptosi, sulla regolazione e sull'espressione dell'osteocalcina e sull'impatto dell'adenosina sul metabolismo osseo.

Nel complesso, le cellule MG-63 rimangono una pietra miliare nello studio delle cellule umane simili agli osteoblasti, offrendo approfondimenti sulla crescita cellulare, sulla differenziazione e sulle intricate interazioni tra le cellule ossee e il loro microambiente.

Tessuto
Osso
Malattia
Osteosarcoma
Sito metastatico
Osso, femore sinistro
Sinonimi
  • M-G63
  • MG63

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MG-63 (numero di catalogo Cytion 300441)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0426

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Fattore di crescita trasformante beta (TGF beta, tipo I e tipo II)
Prodotti
Interferone

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
14 anni
Etnia
Caucasico