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MG-63
Pañuelo de papel
Hueso
Enfermedad
Osteosarcoma
Lugar de metástasis
Hueso, fémur izquierdo
Sinónimos
M-G63, MG63

Documentos

MG-63

Cell line · Número de producto 300441

MG-63 cells, a human osteosarcoma cell line derived from the bone of a 14-year-old White male patient with osteosarcoma, are a pivotal model in bone biolo...

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01Información general

Descripción

Las células MG-63, una línea celular de osteosarcoma humano derivada del hueso de un paciente varón blanco de 14 años con osteosarcoma, son un modelo fundamental en la investigación de la biología ósea. Las células de osteosarcoma humano MG63, con su morfología de fibroblastos y su rápida proliferación, constituyen una herramienta esencial para comprender el metabolismo óseo, especialmente en el contexto del osteosarcoma.

Las células MG-63 producen altos niveles de interferón humano cuando se inducen con agentes como el ácido polinosínico-policidílico, la cicloheximida y la actinomicina D. El aumento de la producción de interferón es crucial para los estudios centrados en las respuestas inmunitarias dentro del microentorno óseo.

La siembra de células MG-63 en superficies biocompatibles como discos de Bioglass, discos de titanio (Ti-6Al-4V) y aleaciones de cromo-cobalto (Co-Cr-Mo) es posible gracias a su fuerte adherencia y fijación celular. Constituyen un buen modelo osteoblástico para estudiar la osteointegración y las interacciones célula ósea-implante con películas de carbono amorfo y tántalo compuesto.

La investigación con la línea celular osteoblástica MG-63 se centra a menudo en la apoptosis, la regulación y expresión de la osteocalcina y el impacto de la adenosina en el metabolismo óseo.

En general, las células MG-63 siguen siendo una piedra angular en el estudio de las células similares a los osteoblastos humanos, ya que ofrecen información sobre el crecimiento celular, la diferenciación y las intrincadas interacciones entre las células óseas y su microentorno.

Pañuelo de papel
Hueso
Enfermedad
Osteosarcoma
Lugar de metástasis
Hueso, fémur izquierdo
Sinónimos
  • M-G63
  • MG63

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto

04Identificadores

Referencia
MG-63 (número de catálogo 300441 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0426

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Factor de crecimiento transformante beta (TGF beta, tipo I y tipo II)
Productos
Interferón

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
14 años
Origen étnico
Caucásico