Siirry sisältöön
MG-63
Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Metastaasikohde
Luu, vasen reisiluu
Synonyymit
M-G63, MG63

Asiakirjat

MG-63

Cell line · Tuotenumero 300441

MG-63 cells, a human osteosarcoma cell line derived from the bone of a 14-year-old White male patient with osteosarcoma, are a pivotal model in bone biolo...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MG-63-solut, ihmisen osteosarkoomasolulinja, joka on peräisin 14-vuotiaan valkoihoisen osteosarkoomapotilaan luusta, ovat keskeinen malli luubiologisessa tutkimuksessa. MG63-ihmisen osteosarkoomasolut, joilla on fibroblastimorfologia ja nopea proliferaatio, ovat olennainen väline luun aineenvaihdunnan ymmärtämisessä, erityisesti osteosarkooman yhteydessä.

MG-63-solut tuottavat runsaasti ihmisen interferonia, kun niitä indusoidaan aineilla, kuten polyinosiinihappo-polysytidyylihapolla, sykloheksimidillä ja aktinomysiini D:llä. Tehostunut interferonin tuotanto on ratkaisevan tärkeää tutkimuksissa, joissa keskitytään immuunivasteisiin luun mikroympäristössä.

MG-63-solujen kylväminen bioyhteensopiville pinnoille, kuten Bioglass-levyille, titaanilevyille (Ti-6Al-4V) ja kobolttikromiseoksille (Co-Cr-Mo), on mahdollista, koska solut tarttuvat ja kiinnittyvät niihin voimakkaasti. Ne ovat hyvä osteoblastimalli osseointegraation ja luusolujen ja implantin vuorovaikutuksen tutkimiseen amorfisten hiilikalvojen ja komposiittitantaalin kanssa.

Tutkimuksissa, joissa käytetään osteoblastisolulinjaa MG-63, keskitytään usein apoptoosiin, osteokalsiinin säätelyyn ja ilmentymiseen sekä adenosiinin vaikutukseen luun aineenvaihduntaan.

Kaiken kaikkiaan MG-63-solut ovat edelleen kulmakivi ihmisen osteoblastin kaltaisten solujen tutkimuksessa, sillä ne tarjoavat tietoa solujen kasvusta, erilaistumisesta sekä luusolujen ja niiden mikroympäristön monimutkaisista vuorovaikutussuhteista.

Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Metastaasikohde
Luu, vasen reisiluu
Synonyymit
  • M-G63
  • MG63

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset

04Tunnisteet

Lähdeviite
MG-63 (Cytionin luettelonumero 300441)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0426

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Transformoiva kasvutekijä beeta (TGF-beeta, tyyppi I ja tyyppi II)
Tuotteet
Interferoni

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
14 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen