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MIN-6
Gewebe
Bauchspeicheldrüse, Langerhans-Inseln
Krankheit
Maus-Insulinom
Synonyme
Min6, MIN6, Mouse INsulinoma 6

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MIN-6

Cell line · Artikelnummer 302148

The MIN-6 cell line is a murine pancreatic beta cell line derived from insulinoma. It is commonly used in research to study insulin secretion mechanisms a...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die MIN-6-Zelllinie ist eine aus einem Insulinom abgeleitete Betazelllinie der Bauchspeicheldrüse der Maus. Sie wird in der Forschung häufig zur Untersuchung der Mechanismen der Insulinsekretion und der Funktion der Betazellen verwendet, da sie in der Lage ist, als Reaktion auf den Glukosespiegel Insulin zu synthetisieren und abzusondern. Diese Zelllinie ist besonders wertvoll, weil sie viele der funktionellen Merkmale primärer Betazellen der Bauchspeicheldrüse beibehält, was sie zu einem nützlichen Modell für die Diabetesforschung macht.

MIN-6-Zellen weisen eine glukoseabhängige Insulinsekretion auf, was ein entscheidendes Merkmal für Studien ist, die sich mit der Regulierung der Insulinfreisetzung und den zellulären Reaktionen auf unterschiedliche Glukosekonzentrationen befassen. Die Zellen werden auch verwendet, um die Proliferation und Apoptose der Betazellen der Bauchspeicheldrüse sowie die Rolle verschiedener Gene und Umweltfaktoren bei diesen Prozessen zu untersuchen. Darüber hinaus haben MIN-6-Zellen dazu beigetragen, potenzielle pharmakologische Wirkstoffe auf ihre Auswirkungen auf die Funktion und das Überleben der Betazellen zu testen, und so zur Entwicklung neuer therapeutischer Strategien für Diabetes beigetragen.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse, Langerhans-Inseln
Krankheit
Maus-Insulinom
Synonyme
  • Min6
  • MIN6
  • Mouse INsulinoma 6

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This murine pancreatic β-cell line (MIN-6) contains an SV40 T-Antigen transgene under insulin promoter control from a transgenic mouse model, supporting immortalization and insulin-related studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Betazelle

04Bezeichner

Quellenangabe
MIN-6 (Cytion Katalognummer 302148)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0431

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Insulin, Glukagon, Somatostatin, Ghrelin
Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 15 % hitzeinaktiviertem FBS und 50 µM Beta-Mercaptoethanol.
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Verwerfen Sie das alte Medium und waschen Sie die Zellen mit PBS. Fügen Sie eine frisch zubereitete 0,025%ige Trypsin/0,02%ige EDTA-Lösung hinzu, die auf 37 Grad Celsius erhitzt wurde, und warten Sie, bis sich die Zellen ablösen, was normalerweise etwa 5 Minuten dauert. Neutralisieren Sie das Trypsin durch Zugabe von frischem Medium, überführen Sie die Zellmischung in ein Röhrchen und zentrifugieren Sie sie. Nach der Zentrifugation den Überstand abnehmen, das Zellpellet in frischem Kulturmedium resuspendieren und die Suspension in neue Flaschen überführen.
Aussaatdichte
5 x 104 Zellen/cm²
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6 IT6 transgene
Alter des Spenders
13 Wochen