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MIN-6
Tessuto
Pancreas, isole di Langerhans
Malattia
Insulinoma di topo
Sinonimi
Min6, MIN6, Mouse INsulinoma 6

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MIN-6

Cell line · Codice prodotto 302148

The MIN-6 cell line is a murine pancreatic beta cell line derived from insulinoma. It is commonly used in research to study insulin secretion mechanisms a...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MIN-6 è una linea cellulare beta pancreatica murina derivata da un insulinoma. È comunemente utilizzata nella ricerca per studiare i meccanismi di secrezione dell'insulina e la funzione delle cellule beta, grazie alla sua capacità di sintetizzare e secernere insulina in risposta ai livelli di glucosio. Questa linea cellulare è particolarmente preziosa perché conserva molte delle caratteristiche funzionali delle cellule beta pancreatiche primarie, il che la rende un modello utile per la ricerca sul diabete.

Le cellule MIN-6 mostrano una secrezione di insulina sensibile al glucosio, una caratteristica fondamentale per gli studi che si concentrano sulla regolazione del rilascio di insulina e sulle risposte cellulari alle diverse concentrazioni di glucosio. Le cellule sono utilizzate anche per studiare la proliferazione e l'apoptosi delle beta-cellule pancreatiche, nonché il ruolo di vari geni e fattori ambientali in questi processi. Inoltre, le cellule MIN-6 sono state fondamentali per testare potenziali agenti farmacologici per i loro effetti sulla funzione e sulla sopravvivenza delle beta-cellule, contribuendo così allo sviluppo di nuove strategie terapeutiche per il diabete.

Tessuto
Pancreas, isole di Langerhans
Malattia
Insulinoma di topo
Sinonimi
  • Min6
  • MIN6
  • Mouse INsulinoma 6

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This murine pancreatic β-cell line (MIN-6) contains an SV40 T-Antigen transgene under insulin promoter control from a transgenic mouse model, supporting immortalization and insulin-related studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Cellula beta

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MIN-6 (numero di catalogo Cytion 302148)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0431

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Insulina, glucagone, somatostatina, grelina
Virus
Trasformante: Simian virus 40 (SV40)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al mezzo il 15% di FBS inattivato termicamente e 50 µM di beta-mercaptoetanolo.
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Eliminare il vecchio terreno e lavare le cellule con PBS. Aggiungere una soluzione di tripsina 0,025%/0,02% EDTA appena preparata e riscaldata a 37 gradi Celsius e attendere che le cellule si stacchino, il che di solito richiede circa 5 minuti. Neutralizzare la tripsina aggiungendo terreno fresco, quindi trasferire la miscela di cellule in una provetta e centrifugare. Dopo la centrifugazione, rimuovere il surnatante, risospendere il pellet di cellule in terreno di coltura fresco e trasferire la sospensione in nuove fiasche.
Densità di semina
5 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6 IT6 transgenico
Età dei donatori
13 settimane