Mine otse sisu juurde
MIN-6
Kude
Pankreas, Langerhansi saarekesed
Haigus
Hiire insulinoom
Sünonüümid
Min6, MIN6, Mouse INsulinoma 6

Dokumendid

MIN-6

Cell line · Toote number 302148

The MIN-6 cell line is a murine pancreatic beta cell line derived from insulinoma. It is commonly used in research to study insulin secretion mechanisms a...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MIN-6 rakuliin on hiire pankrease beetarakkude liin, mis on saadud insulinoomist. Seda kasutatakse tavaliselt teadusuuringutes insuliini sekretsiooni mehhanismide ja beetarakkude funktsiooni uurimiseks, kuna see suudab sünteesida ja eritada insuliini vastuseks glükoositaseme muutustele. See rakuliin on eriti väärtuslik, sest see säilitab paljud primaarsete pankrease beetarakkude funktsionaalsed omadused, mis muudab selle kasulikuks mudeliks diabeedi uurimisel.

MIN-6 rakkudel on glükoosile reageeriv insuliini sekretsioon, mis on kriitiline omadus uuringutes, mis keskenduvad insuliini vabanemise reguleerimisele ja rakkude reaktsioonile erinevatele glükoosikontsentratsioonidele. Rakke kasutatakse ka kõhunäärme beetarakkude proliferatsiooni ja apoptoosi ning erinevate geenide ja keskkonnategurite rolli uurimiseks nendes protsessides. Lisaks on MIN-6 rakud olnud olulised võimalike farmakoloogiliste ainete testimisel nende mõju suhtes beetarakkude funktsioonile ja ellujäämisele, aidates seega kaasa uute diabeedi ravistrateegiate väljatöötamisele.

Kude
Pankreas, Langerhansi saarekesed
Haigus
Hiire insulinoom
Sünonüümid
  • Min6
  • MIN6
  • Mouse INsulinoma 6

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine pancreatic β-cell line (MIN-6) contains an SV40 T-Antigen transgene under insulin promoter control from a transgenic mouse model, supporting immortalization and insulin-related studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Beeta rakk

04Tunnused

Viide
MIN-6 (Cytioni katalooginumber 302148)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0431

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Insuliin, glükagoon, somatostatiin, greliin
Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 15% kuumutamisega inaktiveeritud FBS-iga, 50 µM beeta-merkaptoetanooliga.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Visake vana söötme ära ja peske rakud PBSiga. Lisage värskelt valmistatud 0,025% trüpsiini/0,02% EDTA lahust, mida on kuumutatud 37 kraadini, ja oodake, kuni rakud eralduvad, mis tavaliselt võtab umbes 5 minutit. Neutraliseerige trüpsiin, lisades värsket keskkonda, seejärel viige rakusegu katseklaasi ja tsentrifuugige. Pärast tsentrifuugimist eemaldage supernatant, resuspenseerige rakupellet värskes söötmes ja viige suspensioon uutesse kolvidesse.
Külvitihedus
5 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6 IT6 transgeeniline
Doonori vanus
13 nädalat