Siirry sisältöön
MIN-6
Kudos
Haima, Langerhansin saarekkeet
Sairaus
Hiiren insulinoma
Synonyymit
Min6, MIN6, Mouse INsulinoma 6

Asiakirjat

MIN-6

Cell line · Tuotenumero 302148

The MIN-6 cell line is a murine pancreatic beta cell line derived from insulinoma. It is commonly used in research to study insulin secretion mechanisms a...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MIN-6-solulinja on hiiren haiman beetasolulinja, joka on peräisin insulinoomasta. Sitä käytetään yleisesti tutkimuksessa insuliinin eritysmekanismien ja beetasolujen toiminnan tutkimiseen, koska se pystyy syntetisoimaan ja erittämään insuliinia vastauksena glukoosipitoisuuteen. Tämä solulinja on erityisen arvokas, koska se säilyttää monet primaaristen haiman beetasolujen toiminnalliset ominaisuudet, mikä tekee siitä hyödyllisen mallin diabetestutkimukseen.

MIN-6-soluilla on glukoosiin reagoiva insuliinin eritys, mikä on kriittinen ominaisuus tutkimuksissa, joissa keskitytään insuliinin vapautumisen säätelyyn ja solujen vasteisiin vaihteleviin glukoosipitoisuuksiin. Soluja käytetään myös haiman beetasolujen proliferaation ja apoptoosin sekä eri geenien ja ympäristötekijöiden roolin tutkimiseen näissä prosesseissa. Lisäksi MIN-6-soluilla on testattu mahdollisten farmakologisten aineiden vaikutuksia beetasolujen toimintaan ja eloonjäämiseen, mikä on edistänyt uusien diabeteksen hoitostrategioiden kehittämistä.

Kudos
Haima, Langerhansin saarekkeet
Sairaus
Hiiren insulinoma
Synonyymit
  • Min6
  • MIN6
  • Mouse INsulinoma 6

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine pancreatic β-cell line (MIN-6) contains an SV40 T-Antigen transgene under insulin promoter control from a transgenic mouse model, supporting immortalization and insulin-related studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Beetasolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
MIN-6 (Cytionin luettelonumero 302148)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0431

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Insuliini, glukagoni, somatostatiini, greliini
Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää väliaineeseen 15 % lämpöinaktivoitua FBS:ää, 50 µM beeta-merkaptoetanolia.
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Hävitä vanha väliaine ja pese solut PBS:llä. Lisätään tuore 0,025-prosenttinen trypsiini/0,02-prosenttinen EDTA-liuos, joka on lämmitetty 37 celsiusasteeseen, ja odotetaan, kunnes solut irtoavat, mikä kestää yleensä noin 5 minuuttia. Neutraloi trypsiini lisäämällä tuoretta elatusainetta, siirrä soluseos putkeen ja sentrifugoi. Sentrifugoinnin jälkeen poista supernatantti, suspendoi solupelletti uudelleen tuoreessa kasvatusmediassa ja siirrä suspensio uusiin pulloihin.
Kylvötiheys
5 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6 IT6 siirtogeeninen
Luovuttajan ikä
13 viikkoa