Pāriet uz saturu
MIN-6
Audums
Aizkuņģa dziedzeris, Langerhansa saliņas
Slimība
Peles insulinoma
Sinonīmi
Min6, MIN6, Mouse INsulinoma 6

Dokumenti

MIN-6

Cell line · Preces numurs 302148

The MIN-6 cell line is a murine pancreatic beta cell line derived from insulinoma. It is commonly used in research to study insulin secretion mechanisms a...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MIN-6 šūnu līnija ir peļu aizkuņģa dziedzera beta šūnu līnija, kas iegūta no insulinoma. To parasti izmanto pētījumos, lai pētītu insulīna sekrēcijas mehānismus un beta šūnu funkcijas, jo tā spēj sintezēt un izdalīt insulīnu, reaģējot uz glikozes līmeni. Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga, jo tā saglabā daudzas no primāro aizkuņģa dziedzera beta šūnu funkcionālajām īpašībām, padarot to par noderīgu modeli diabēta pētījumiem.

MIN-6 šūnām piemīt uz glikozi reaģējoša insulīna sekrēcija, kas ir būtiska iezīme pētījumos, kuros galvenā uzmanība tiek pievērsta insulīna izdalīšanās regulācijai un šūnu reakcijai uz mainīgu glikozes koncentrāciju. Šūnas izmanto arī aizkuņģa dziedzera beta šūnu proliferācijas un apoptozes, kā arī dažādu gēnu un vides faktoru lomas šajos procesos izpētei. Turklāt MIN-6 šūnas ir bijušas noderīgas potenciālo farmakoloģisko līdzekļu iedarbības testēšanā uz beta šūnu funkciju un izdzīvošanu, tādējādi veicinot jaunu diabēta terapeitisko stratēģiju izstrādi.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris, Langerhansa saliņas
Slimība
Peles insulinoma
Sinonīmi
  • Min6
  • MIN6
  • Mouse INsulinoma 6

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine pancreatic β-cell line (MIN-6) contains an SV40 T-Antigen transgene under insulin promoter control from a transgenic mouse model, supporting immortalization and insulin-related studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Beta šūna

04Identifikatori

Atsauce
MIN-6 (Cytion kataloga numurs 302148)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0431

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Insulīns, glikagons, somatostatīns, grelīns
Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 15 % siltuma inaktivētu FBS, 50 µM beta-merkaptoetanolu.
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Izmetiet veco barotni un izskalojiet šūnas ar PBS. Pievienojiet svaigi sagatavotu 0,025 % tripsīna/0,02 % EDTA šķīdumu, kas uzsildīts līdz 37 °C temperatūrai, un pagaidiet, līdz šūnas atdalās, kas parasti ilgst apmēram 5 minūtes. Neitralizēt tripsīnu, pievienojot svaigu barotni, pēc tam šūnu maisījumu pārvietot mēģenē un centrifugēt. Pēc centrifugēšanas noņemiet supernatantu, šūnu granulātu atkārtoti suspendējiet svaigā barotnē un pārnesiet suspensiju uz jaunām kolbām.
Sēšanas blīvums
5 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6 IT6 transgēnu
Donora vecums
13 nedēļas