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NCI-H441
Gewebe
Lunge
Krankheit
Papilläres Adenokarzinom
Metastasenherd
Perikarderguss
Synonyme
H441, H-441, NCI-H441-4, NCI-441, NCIH441

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NCI-H441

Cell line · Artikelnummer 305219

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die NCI-H441-Zelllinie, auch bekannt als H441, wurde 1982 aus dem Pleuraerguss eines männlichen Patienten mit papillärem Adenokarzinom der Lunge gewonnen und ist eine gut charakterisierte epitheliale Adenokarzinom-Zelllinie. Diese Zellen werden aufgrund ihrer Relevanz für die Lungenepithelbiologie intensiv in der biologischen Forschung eingesetzt und sind damit ein wichtiges In-vitro-Modell für Studien zum transepithelialen Transport und zur Epithelbarrierefunktion.

Die NCI-H441-Zelllinie ist ein wichtiges Instrument, um unser Verständnis der Verteilung von Medikamenten in der Lunge und der Tumorkinetik zu verbessern. Ihre Verwendung in 3D-Zellkulturmodellen ermöglicht die detaillierte Untersuchung der Absorption, Verteilung, Verstoffwechselung und Ausscheidung von Medikamenten in der Lunge, wobei die In-vivo-Bedingungen genau nachgeahmt werden.

Aufgrund ihrer Herkunft und Eigenschaften sind NCI-H441-Zellen besonders wertvoll für die Forschung, die sich auf die distale Lunge und damit verbundene Erkrankungen, einschließlich Lungenadenokarzinom, konzentriert. Sie dienen als stabiles und relevantes Zellmodell für das Verständnis der Mechanismen von Lungenerkrankungen und die Bewertung potenzieller therapeutischer Interventionen.

NCI-H441-Zellen spielen eine wichtige Rolle in der 3D-Zellkultur, im Hochdurchsatz-Screening und in toxikologischen Studien und liefern wertvolle Daten über zelluläre Reaktionen und die Wirksamkeit von Therapeutika. Eine bemerkenswerte Anwendung der menschlichen Zelllinie H441 ist ihre Verwendung als Transfektionswirt für die Expression von Lungensurfactantprotein (SP-B) unter Verwendung des Firefly-Luc-Reportersystems, was ihre Rolle in Studien zur Inhalationsbiopharmazie und zum transepithelialen Transport unterstreicht. Diese Fähigkeit sowie die Expression von mRNA und Protein für das wichtige Surfactant-Apoprotein (SP-A) unterstreichen die Bedeutung der Zelllinie für die Untersuchung der Lungenfunktion und -erkrankungen, insbesondere solcher, die die Regulation und Synthese von Surfactant beeinflussen.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Papilläres Adenokarzinom
Metastasenherd
Perikarderguss
Synonyme
  • H441
  • H-441
  • NCI-H441-4
  • NCI-441
  • NCIH441

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Club-Zelle
Karyotyp
Die NCI-H441-Zelllinie weist einen hyperdiploiden Karyotyp auf, mit einer durchschnittlichen Chromosomenzahl von 52, obwohl Variationen von 44 bis 59 Chromosomen dokumentiert wurden.
Verdopplungszeit
58 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H441 (Cytion-Katalognummer 305219)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1561

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
33 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch

09Produktdetails

Zusammensetzungstabelle