Mine otse sisu juurde
Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
Hcc38, HCC-38, HCC 38 HCC0038, Hamon Cancer Center 38

Dokumendid

HCC38

Cell line · Toote number 305307

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC38 rakuliin on kolmiknegatiivne rinnavähi (TNBC) mudel, mida iseloomustab östrogeeni retseptori (ER), progesterooni retseptori (PR) ja HER2 ekspressiooni puudumine, mis muudab selle kriitiliseks vahendiks agressiivsete rinnavähi alatüüpide uurimiseks, mis ei reageeri hormoon- või HER2-suunatud ravile. HCC38 rakud on eriti väärtuslikud raviresistentsuse ja TNBC progresseerumist põhjustavate mehhanismide uurimisel. Näiteks võib tsisplatiiniga kokkupuude viia tsisplatiinile resistentsete subkloonide, näiteks HCC38CisR, tekkimiseni, mis näitavad retseptoritürosiini kinaaside (nt IGF1R ja EGFR) poolt vahendatud pro-survivalentsete radade suurenenud aktiveerimist. Sellise resistentsuse vastu saab võidelda sihipärase raviga, nagu NVP-BEZ235, kahekordne PI3K/mTOR-inhibiitor, mis on näidanud potentsiaali taastada tsisplatiinitundlikkust HCC38CisR-i puhul.

Lisaks on HCC38 rakuliini uuritud apoptoosi- ja invasiomehhanismide kontekstis. On näidatud, et konkreetsete geenide, näiteks OC90, koputamine vähendab märkimisväärselt rakkude elujõulisust ja suurendab apoptoosi HCC38-s, mis rõhutab konkreetsete molekulaarsete sihtmärkide rolli rakkude ellujäämises ja invasiivses käitumises. See omadus on oluline TNBC jaoks uute terapeutiliste lähenemisviiside leidmiseks. Lisaks sellele rõhutab HCC38 ravivastuse, sealhulgas resistentsuse mehhanismid, kasulikkust ravimikombinatsioonide uurimisel, mis võiksid resistentsust vältida ja ravi tõhusust suurendada.

Lisaks on uuringud HCC38-ga näidanud, et väikesemolekulaarsed inhibiitorid on resistentsuse ületamisel tõhusad, kui neid kombineeritakse tavapäraste kemoterapeutikumidega. Näiteks on PI3K/mTOR-inhibiitorid koos traditsiooniliste keemiaravimitega lubavad vähendada proliferatsioonikiirust ja esile kutsuda apoptoosi resistentsetes rakuvariantides. Sellised leiud aitavad kaasa sihipärase ravi väljatöötamisele, mis aitab lahendada TNBC raviresistentsusega seotud probleeme.

Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • Hcc38
  • HCC-38
  • HCC 38 HCC0038
  • Hamon Cancer Center 38

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakk

04Tunnused

Viide
HCC38 (Cytioni katalooginumber 305307)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1267

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Epiteeli glükoproteiin 2 (EGP2), tsütokeratiin 19
Onkogeenid
Her2/neu-, p53+
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
50 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia