Pāriet uz saturu
Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
Hcc38, HCC-38, HCC 38 HCC0038, Hamon Cancer Center 38

Dokumenti

HCC38

Cell line · Preces numurs 305307

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC38 šūnu līnija ir trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) modelis, kam raksturīga estrogēnu receptoru (ER), progesterona receptoru (PR) un HER2 ekspresijas trūkums, padarot to par būtisku instrumentu agresīvu krūts vēža apakštipu izpētei, kas nereaģē uz hormonu vai HER2 mērķterapiju. HCC38 šūnas ir īpaši vērtīgas, lai pētītu rezistenci pret ārstēšanu un mehānismus, kas nosaka TNBC progresēšanu. Piemēram, cisplatīna iedarbības rezultātā var attīstīties pret cisplatīnu rezistenti subkloni, piemēram, HCC38CisR, kuriem ir pastiprināta aktivizācija prodzīvošanas ceļiem, ko nodrošina receptoru tirozīna kināzes (piemēram, IGF1R un EGFR). Šo rezistenci var novērst ar mērķtiecīgu terapiju, piemēram, NVP-BEZ235, duālo PI3K/mTOR inhibitoru, kas ir pierādījis potenciālu atjaunot HCC38CisR jutību pret cisplatīnu.

Turklāt HCC38 šūnu līnija ir pētīta saistībā ar apoptozes un invazijas mehānismiem. Pierādīts, ka specifisku gēnu, piemēram, OC90, nojaukšana ievērojami samazina HCC38 šūnu dzīvotspēju un pastiprina apoptozi, uzsverot specifisku molekulāro mērķu lomu šūnu izdzīvošanā un invazīvajā uzvedībā. Šī īpašība ir būtiska, lai noteiktu jaunas terapeitiskās pieejas TNBC. Turklāt HCC38 atbildes reakcija uz ārstēšanu, tostarp rezistences mehānismi, norāda uz tās lietderību zāļu kombināciju izpētei, kas varētu apiet rezistenci un uzlabot ārstēšanas efektivitāti.

Turklāt pētījumi ar HCC38 ir pierādījuši mazmolekulāro inhibitoru efektivitāti rezistences pārvarēšanā, kombinējot tos ar parastajiem ķīmijterapijas līdzekļiem. Piemēram, līdztekus tradicionālajiem ķīmijterapijas līdzekļiem PI3K/mTOR inhibitoru pielietošanas stratēģijas, kas ietver PI3K/mTOR inhibitorus, ir daudzsološas, samazinot proliferācijas rādītājus un izraisot apoptozi rezistentos šūnu variantos. Šādi atklājumi palīdz izstrādāt mērķtiecīgas terapijas, kas risina TNBC rezistences pret ārstēšanu problēmas.

Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
  • Hcc38
  • HCC-38
  • HCC 38 HCC0038
  • Hamon Cancer Center 38

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna

04Identifikatori

Atsauce
HCC38 (Cytion kataloga numurs 305307)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1267

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Epitēlija glikoproteīns 2 (EGP2), citokeratīns 19
Onkogēni
Her2/neu-, p53+
Mutāciju profils
Mutācija: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
50 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis