Mine otse sisu juurde
FAMPAC
Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
FamPAC, Fampac, PA-CLS-13, PA-CLS 13

Dokumendid

FAMPAC

Cell line · Toote number 300309

The Fampac cell line was established from the primary pancreatic adenocarcinoma of an adult female who had a familial predisposition to pancreatic cancer....

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Fampac'i rakuliin loodi täiskasvanud naise primaarsest kõhunäärme adenokartsinoomist, kellel oli perekondlik eelsoodumus kõhunäärmevähi tekkeks. Need rakud on epiteliaalsed ja neid on laialdaselt kasutatud kõhunäärmevähi bioloogilise käitumise uurimisel, sealhulgas kasvajate progresseerumise, metastaaside tekke ja ravivastuse uuringutes. Fampac'i rakuliin on tuntud oma agressiivse tuumori moodustamise võime poolest ksenotransplantaadimudelites, mis muudab selle väärtuslikuks in vivo uuringutes, mis on seotud ravimite efektiivsuse ja vähirakkude bioloogiaga.

In vitro on Fampac'i rakkudel kõhunäärme adenokartsinoomile iseloomulikud omadused, sealhulgas resistentsus apoptoosi suhtes ja võime proliferatsiooniks keemiliselt määratletud tingimustes. See resistentsus programmeeritud rakusurma suhtes on kriitiline omadus uuringutes, mille eesmärk on uurida uusi kemoterapeutilisi aineid ja nende potentsiaali vähirakkude surma esilekutsumiseks. Lisaks on Fampac'i rakke kasutatud kõhunäärmevähi patogeneesi molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, andes ülevaate geneetilistest mutatsioonidest, vähi proliferatsioonis osalevatest signaaliradadest ja koostoimetest kasvaja mikrokeskkonnaga.

Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • FamPAC
  • Fampac
  • PA-CLS-13
  • PA-CLS 13

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel on adenokartsinoom
Karyotüüp
45-48, x,+3,-5,+der(5),+der(5),+der(5)add(p14),-7,+10,+2der(10)add(p15)add(q26),der(12)add(p13),der(12)add(p11),-13,-13,+der(13)add(p11),-14,der?(14),-15,i(15q),der(16)(q+),-19,-20,-21,-22,+3-5mar
Kahekordistumisaeg
24 kuni 48 tundi

04Tunnused

Viide
FAMPAC (Cytioni katalooginumber 300309)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_5749

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53, punktmutatsioon (CCG (Arg) kuni CAC (His))
Antigeeni ekspressioon
FAMPAC rakud kannavad homosügootset Kras-mutatsiooni koodonis12: GGT(Gly) >GTT(Val)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 2–3 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
43 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia