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FAMPAC
Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
FamPAC, Fampac, PA-CLS-13, PA-CLS 13

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FAMPAC

Cell line · Codice prodotto 300309

The Fampac cell line was established from the primary pancreatic adenocarcinoma of an adult female who had a familial predisposition to pancreatic cancer....

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Fampac è stata ottenuta dall'adenocarcinoma pancreatico primario di una donna adulta con una predisposizione familiare al cancro del pancreas. Queste cellule sono di natura epiteliale e sono state ampiamente utilizzate nella ricerca sul comportamento biologico del cancro al pancreas, compresi gli studi sulla progressione del tumore, sulle metastasi e sulla risposta terapeutica. La linea cellulare Fampac è nota per la sua aggressiva capacità di formare tumori in modelli di xenotrapianto, il che la rende preziosa per gli studi in vivo relativi all'efficacia dei farmaci e alla biologia delle cellule tumorali.

In vitro, le cellule Fampac presentano caratteristiche tipiche dell'adenocarcinoma pancreatico, tra cui la resistenza all'apoptosi e la capacità di proliferare in condizioni chimicamente definite. Questa resistenza alla morte cellulare programmata è una caratteristica fondamentale per gli studi che cercano di esplorare nuovi agenti chemioterapici e il loro potenziale di indurre la morte delle cellule tumorali. Inoltre, le cellule Fampac sono state utilizzate per studiare i meccanismi molecolari della patogenesi del cancro al pancreas, offrendo approfondimenti sulle mutazioni genetiche, sulle vie di segnalazione coinvolte nella proliferazione del cancro e sulle interazioni con il microambiente tumorale.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • FamPAC
  • Fampac
  • PA-CLS-13
  • PA-CLS 13

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, nei topi nudi, l'adenocarcinoma
Cariotipo
45-48, x,+3,-5,+der(5),+der(5),+der(5)add(p14),-7,+10,+2der(10)add(p15)add(q26),der(12)add(p13),der(12)add(p11),-13,-13,+der(13)add(p11),-14,der?(14),-15,i(15q),der(16)(q+),-19,-20,-21,-22,+3-5mar
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
FAMPAC (numero di catalogo Cytion 300309)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5749

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53, mutazione puntiforme (da CCG (Arg) a CAC (His))
Espressione dell'antigene
Le cellule FAMPAC portano una mutazione Kras omozigote nel codone 12: GGT(Gly) >GTT(Val)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 2-3 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
43 anni
Etnia
Caucasico