Mine otse sisu juurde
NUGC-4
Kude
Metastaatiline
Haigus
Mao sigaretirõngaste adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Paragastriiline lümfisõlm
Sünonüümid
NUGC4, NU-GC-4, Nagoya University-Gastric Cancer-4

Dokumendid

NUGC-4

Cell line · Toote number 305645

NUGC-4 is a human gastric cancer cell line established from metastatic paragastric lymph nodes of an adult patient with poorly differentiated adenocarcino...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NUGC-4 on inimese maovähi rakuliin, mis on loodud täiskasvanud patsiendi metastaatilistest paragastrilistest lümfisõlmedest, kellel oli halvasti diferentseeritud adenokartsinoom, millel esinesid fokaalsed signet-ring-rakkude kartsinoomi tunnused. Rakuliin arendati kirurgilise resektsiooni käigus saadud kasvajakoest ning seda on edukalt säilitatud nii in vitro kui ka siirdatava kasvajana alasti hiirtel. In vitro kasvavad NUGC-4 rakud peamiselt sfääriliste rakkudena, millest osa on vabalt ujuvad, ning neil on epiteelirakkudele omased tunnused, mis on kinnitatud elektronmikroskoopia abil. Nende hulka kuuluvad hästi arenenud endoplasmaatiline retikulum, Golgi aparaat, tsütoplasmaatilised filamendid ja desmosoomitaolised liitekohtad. Märkimisväärselt sisaldavad rakud tsütoplasmasiseseid mikroküste, mis annavad neile unikaalse morfoloogia.

Kromosoomianalüüs näitab, et NUGC-4 rakkudel on peaaegu triploidsed kromosoomid, mille modaalne arv on in vitro vahemikus 52–54 ja in vivo ligikaudu 53. Rakud näitavad järjepidevaid trisoomiaid mitmes kromosoomirühmas, kuigi konkreetseid markerkromosoome ei tuvastatud. NUGC-4 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 29,9 tundi, mis näitab mõõdukalt kiiret proliferatsioonikiirust standardsetes kultiveerimistingimustes. Kolme seotud maovähi liini (NUGC-2, NUGC-3 ja NUGC-4) hulgas näitas NUGC-4 in vitro suurimat tundlikkust vähivastaste ravimite, nagu mitomütsiin C ja adriamütsiin, suhtes, mis viitab kõrgendatud reageerimisvõimele teatud DNA-d kahjustavate kemoteraapiavahendite suhtes.

Histoloogiliselt sarnanevad NUGC-4-st saadud ksenotransplantaadid emakasvaja, säilitades skirroosse kartsinoomi tunnuseid. Liini on kasutatud ravimireaktsiooni profiili koostamisel ja molekulaarse iseloomustamise uuringutes osana suuremahulistest vähirakkude liinide projektidest. Kliinilise päritolu, histoloogilise täpsuse ja ravimite tundlikkuse profiili kombinatsioon teeb NUGC-4-st asjakohase mudeli difuusse tüüpi omadustega agressiivsete ja kemoteraapiale reageerivate mao adenokartsinoomide uurimiseks.

Kude
Metastaatiline
Haigus
Mao sigaretirõngaste adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Paragastriiline lümfisõlm
Sünonüümid
  • NUGC4
  • NU-GC-4
  • Nagoya University-Gastric Cancer-4

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Kahekordistumisaeg
29,9 tundi

04Tunnused

Viide
NUGC-4 (Cytioni katalooginumber 305645)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3082

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Acccutase
Külvitihedus
1–4 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
35 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani