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NUGC-4
Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma gastrico a cellule ad anello signet
Sito metastatico
Linfonodo paragastrico
Sinonimi
NUGC4, NU-GC-4, Nagoya University-Gastric Cancer-4

Documenti

NUGC-4

Cell line · Codice prodotto 305645

NUGC-4 is a human gastric cancer cell line established from metastatic paragastric lymph nodes of an adult patient with poorly differentiated adenocarcino...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

NUGC-4 è una linea cellulare di carcinoma gastrico umano ottenuta da linfonodi paragastrici metastatici di un paziente adulto affetto da adenocarcinoma scarsamente differenziato che presentava caratteristiche focali di carcinoma a cellule ad anello con sigillo. La linea cellulare è stata sviluppata a partire da tessuti tumorali prelevati durante la resezione chirurgica ed è stata mantenuta con successo sia in vitro sia come tumore trapiantabile in topi nude. In vitro, le cellule NUGC-4 crescono prevalentemente come cellule sferiche, con alcune popolazioni libere, e presentano caratteristiche epiteliali confermate al microscopio elettronico. Queste includono un reticolo endoplasmatico ben sviluppato, l'apparato di Golgi, filamenti citoplasmatici e giunzioni simili a desmosomi. In particolare, le cellule contengono microcisti intracitoplasmatiche, che contribuiscono alla loro morfologia unica.

L'analisi cromosomica rivela che le cellule NUGC-4 possiedono un cariotipo quasi triploide con un numero modale di cromosomi compreso tra 52 e 54 in vitro e circa 53 in vivo. Le cellule mostrano trisomie costanti in diversi gruppi cromosomici, sebbene non siano stati identificati cromosomi marcatori specifici. Il tempo di raddoppio per NUGC-4 è di circa 29,9 ore, indicando un tasso di proliferazione moderatamente rapido in condizioni di coltura standard. Tra le tre linee correlate di cancro gastrico (NUGC-2, NUGC-3 e NUGC-4), la NUGC-4 ha mostrato la più alta sensibilità in vitro ad agenti antitumorali quali la mitomicina C e l'adriamicina, suggerendo una maggiore reattività a determinati chemioterapici che danneggiano il DNA.

Dal punto di vista istologico, gli xenotrapianti derivati da NUGC-4 assomigliano al tumore originario, mantenendo le caratteristiche di un carcinoma scirroso. La linea è stata utilizzata in studi di profilazione della risposta ai farmaci e di caratterizzazione molecolare nell'ambito di progetti su larga scala relativi alle linee cellulari tumorali. La combinazione di origine clinica, fedeltà istologica e profilo di sensibilità ai farmaci rende NUGC-4 un modello rilevante per lo studio degli adenocarcinomi gastrici aggressivi e chemioreattivi con caratteristiche di tipo diffuso.

Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma gastrico a cellule ad anello signet
Sito metastatico
Linfonodo paragastrico
Sinonimi
  • NUGC4
  • NU-GC-4
  • Nagoya University-Gastric Cancer-4

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tempo di raddoppio
29,9 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NUGC-4 (codice catalogo Cytion 305645)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3082

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Acccutase
Densità di semina
da 1 a 4 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
35 anni
Etnia
Giapponese