Pāriet uz saturu
NUGC-4
Audums
Metastātisks
Slimība
Kuņģa signeta gredzena šūnu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Paragastrālais limfmezgls
Sinonīmi
NUGC4, NU-GC-4, Nagoya University-Gastric Cancer-4

Dokumenti

NUGC-4

Cell line · Preces numurs 305645

NUGC-4 is a human gastric cancer cell line established from metastatic paragastric lymph nodes of an adult patient with poorly differentiated adenocarcino...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NUGC-4 ir cilvēka kuņģa vēža šūnu līnija, kas izveidota no metastātiskiem paragastrālajiem limfmezgliem, kuri iegūti no pieaugušā pacienta ar slikti diferencētu adenokarcinomu, kam piemīt fokālas zīmogu gredzenveida šūnu karcinomas pazīmes. Šūnu līnija tika izveidota no audzēja audiem, kas iegūti ķirurģiskas rezekcijas laikā, un tā ir veiksmīgi uzturēta gan in vitro, gan kā transplantējams audzējs kailpeles pelēm. In vitro NUGC-4 šūnas aug galvenokārt kā sfēriski veidojumi, ar dažām brīvi peldošām populācijām, un tām piemīt epitēlija pazīmes, kas apstiprinātas ar elektronu mikroskopiju. Tās ietver labi attīstītu endoplazmatisko tīklojumu, Golgi aparātu, citoplazmatiskos filamentus un desmosomu līdzīgus savienojumus. Jāatzīmē, ka šūnas satur intracitoplazmatiskas mikrocistas, kas veicina to unikālo morfoloģiju.

Hromosomu analīze liecina, ka NUGC-4 šūnām ir gandrīz triploīds kariotips ar modālo hromosomu skaitu no 52 līdz 54 in vitro un aptuveni 53 in vivo. Šūnas parāda konsekventas trisomijas vairākās hromosomu grupās, lai gan konkrēti marķieru hromosomi netika identificēti. NUGC-4 dubultošanās laiks ir aptuveni 29,9 stundas, kas norāda uz vidēji ātru proliferācijas ātrumu standarta kultivēšanas apstākļos. No trim saistītām kuņģa vēža līnijām (NUGC-2, NUGC-3 un NUGC-4) NUGC-4 in vitro parādīja vislielāko jutību pret pretvēža līdzekļiem, piemēram, mitomicīnu C un adriamicīnu, kas liecina par paaugstinātu reaģētspēju uz noteiktiem DNS bojājošiem ķīmijterapijas līdzekļiem.

Histoloģiski no NUGC-4 iegūtie ksenotransplantāti līdzinās sākotnējam audzējam, saglabājot skirroza karcinomas pazīmes. Šī līnija ir izmantota zāļu reakcijas profilēšanas un molekulārās raksturošanas pētījumos kā daļa no liela mēroga vēža šūnu līniju projektiem. Tās klīniskās izcelsmes, histoloģiskās precizitātes un zāļu jutības profila kombinācija padara NUGC-4 par atbilstošu modeli agresīvu un uz ķīmijterapiju reaģējošu kuņģa adenokarcinomu ar difūza tipa pazīmēm pētīšanai.

Audums
Metastātisks
Slimība
Kuņģa signeta gredzena šūnu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Paragastrālais limfmezgls
Sinonīmi
  • NUGC4
  • NU-GC-4
  • Nagoya University-Gastric Cancer-4

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
29,9 stundas

04Identifikatori

Atsauce
NUGC-4 (Cytion kataloga numurs 305645)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3082

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Acccutase
Sēšanas blīvums
1 līdz 4 x 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
35 gadi
Etniskā piederība
Japāņu