Siirry sisältöön
HNO41 Solut
Kudos
Nielurisat
Sairaus
Pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC)

Asiakirjat

HNO41 Solut

Cell line · Tuotenumero 300126

HNO41-solulinja on peräisin hypofarynksin levyepiteelikarsinoomasta, joka on eräs pään ja kaulan alueen levyepiteelikarsinooman (HNSCC) tyyppi. Tällä solulinjalla on ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HNO41-solulinja on peräisin hypofaryngeaalisesta levyepiteelisolusyövästä, joka on pään ja kaulan levyepiteelisolusyöpätyyppi (HNSCC). Tälle solulinjalle on ominaista useat kromosomipoikkeavuudet, mukaan lukien DNA:n kopiolukumäärän kasvu kromosomialueilla, kuten 3q23-qter, 5p, 7p, 7q21-q22, 8q22.2-qter, 9q22-qter ja 11q13. Näiden alueiden tiedetään kätkevän onkogeenejä, jotka edistävät kasvaimen etenemistä, joten HNO41 on arvokas malli hypofaryngeaalisen syövän taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.

Geneettisen profiilin lisäksi HNO41:ssä on analysoitu angiogeenisten kasvutekijöiden ilmentymistä, jotka ovat kriittisiä kasvaimen kehityksessä ja etäpesäkkeiden muodostumisessa. Solulinjassa ilmentyvät voimakkaasti muun muassa verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF) ja verihiutaleista peräisin oleva kasvutekijä (PDGF). Nämä tekijät edistävät angiogeneesiä eli uusien verisuonten muodostumista, joka on keskeinen prosessi kasvaimen kasvussa ja etäpesäkkeiden muodostumisessa. Näiden tekijöiden esiintyminen HNO41:ssä tukee entisestään sen käyttökelpoisuutta tutkimuksessa, jossa keskitytään kasvaimen angiogeneesin ymmärtämiseen ja HNSCC:n antiangiogeenisten hoitojen arviointiin.

Kudos
Nielurisat
Sairaus
Pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC)

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
HNO41 (Cytionin luettelonumero 300126)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_D224

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
52 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen