Pāriet uz saturu
HNO41 šūnas
Audums
Tonsils
Slimība
Galvas un kakla plakanšūnu karcinoma (HNSCC)

Dokumenti

HNO41 šūnas

Cell line · Preces numurs 300126

HNO41 šūnu līnija ir iegūta no hipofaringeālās plakanšūnu karcinomas, kas ir viens no galvas un kakla plakanšūnu karcinomas (HNSCC) veidiem. Šai šūnu līnijai ir ...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HNO41 šūnu līnija ir iegūta no hipofaringeālās plakanšūnu karcinomas, kas ir galvas un kakla plakanšūnu karcinomas (HNSCC) veids. Šai šūnu līnijai ir raksturīgas vairākas hromosomu aberācijas, tostarp DNS kopiju skaita pieaugums tādos hromosomu apgabalos kā 3q23-qter, 5p, 7p, 7q21-q22, 8q22.2-qter, 9q22-qter un 11q13. Ir zināms, ka šajos reģionos atrodas onkogēni, kas veicina audzēja progresēšanu, padarot HNO41 par vērtīgu modeli hipofaringeālā vēža molekulāro mehānismu izpētei.

Papildus ģenētiskajam profilam HNO41 tika analizēta arī angiogēno augšanas faktoru ekspresija, kas ir kritiski svarīgi audzēja attīstībā un metastāzēšanā. Šai šūnu līnijai, cita starpā, ir izteikta asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) un trombocītu izcelsmes augšanas faktora (PDGF) ekspresija. Šie faktori veicina angiogenezi, jaunu asinsvadu veidošanos, kas ir galvenais process audzēja augšanā un metastāžu veidošanā. Šo faktoru klātbūtne HNO41 vēl vairāk apstiprina tā lietderību pētījumos, kas vērsti uz audzēju angiogēzes izpratni un pretangiogēnas terapijas novērtēšanu HNSCC gadījumā.

Audums
Tonsils
Slimība
Galvas un kakla plakanšūnu karcinoma (HNSCC)

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
HNO41 (Cytion kataloga numurs 300126)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_D224

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
52 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis