Siirry sisältöön
KMH-2
Kudos
Kilpirauhanen
Sairaus
Kilpirauhasen anaplastinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
KMHDASH2, KMH2

Asiakirjat

KMH-2

Cell line · Tuotenumero 305142

KMH-2 on ihmisen anaplastisen kilpirauhassyövän (ATC) solulinja, joka on peräisin miespotilaalta, jolla oli nopeasti etenevä ja kuolemaan johtava kilpirauhassyöpä. Ana...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KMH-2 on ihmisen anaplastinen kilpirauhaskarsinooma (ATC) -solulinja, joka on peräisin miespotilaalta, jolla on nopeasti etenevä ja kuolemaan johtava kilpirauhassyöpä. Anaplastinen kilpirauhaskarsinooma on yksi aggressiivisimmista ja tappavimmista kilpirauhasen pahanlaatuisista kasvaimista, jolle on ominaista sen nopea kasvu ja vastustuskyky tavanomaisia hoitoja vastaan. KMH-2-solut muodostettiin primaarikasvaimesta otetusta biopsiasta ennen kuin potilaalle annettiin kemo- tai sädehoitoa. Nämä solut ovat erittäin tärkeitä ATC:n patofysiologian tutkimisessa sekä uusien terapeuttisten aineiden tehokkuuden testaamisessa.

KMH-2-solulinjalla on in vitro viljeltynä spindelinmuotoinen morfologia, joka on tyypillinen monille anaplastisen kilpirauhaskarsinooman soluille. Nämä solut ovat osoittaneet resistenssiä useille kemoterapeuttisille aineille, kuten sisplatiinille, doksorubisiinille, etoposidille ja pepleomysiinille, mikä kuvastaa ATC:n hoidon kliinistä haastavuutta. KMH-2-solujen kemoresistenssin on katsottu johtuvan monilääkeresistenssiin liittyvän MRP-proteiinin (multidrug resistance-associated protein) mRNA:n ilmentymisestä, vaikka ne eivät ilmentäneet P-glykoproteiiniin liittyviä mdr-1- ja mdr-3-mRNA:ita, mikä viittaa siihen, että niiden lääkeresistenssimekanismi on riippumaton P-glykoproteiinista. Tämä resistenssi kemoterapialle tekee KMH-2:sta arvokkaan mallin vaihtoehtoisten hoitostrategioiden tutkimiseen.

Kasvuominaisuuksiltaan KMH-2-soluilla on suhteellisen pitkä kaksinkertaistumisaika, ja niiden tuumorigeenisyys on vahvistettu ksenotransplantaatiomalleissa, joissa on käytetty atyymisiä nude-hiiriä. Nämä solut vaativat kuitenkin erityisiä olosuhteita, jotta niiden lisääntyminen in vivo tehostuisi, kuten pienen muovilevyn käyttöä injektion jälkeisen kasvun helpottamiseksi. KMH-2:n kromosomianalyysi on paljastanut useita poikkeavuuksia, mikä on yleinen piirre aggressiivisissa syövissä, mikä korostaa entisestään niiden hyödyllisyyttä anaplastisen kilpirauhaskarsinooman geneettisen perustan tutkimisessa.

Kudos
Kilpirauhanen
Sairaus
Kilpirauhasen anaplastinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • KMHDASH2
  • KMH2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Karanmuotoiset solut, joissa on jättiläissoluja
Kaksinkertaistumisaika
58 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KMH-2 (Cytion-tuotenumero 305142)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_S641

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
71 vuotta
Etnisyys
Aasialainen