Preskoči na vsebino
KMH-2
Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
KMHDASH2, KMH2

Dokumenti

KMH-2

Cell line · Številka izdelka 305142

KMH-2 je celična linija človeškega anaplastičnega karcinoma ščitnice (ATC), pridobljena iz moškega bolnika z hitro napredujočo in smrtno obliko raka ščitnice. Ana...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

KMH-2 je celična linija človeškega anaplastičnega karcinoma ščitnice (ATC), pridobljena od moškega bolnika s hitro napredujočo in smrtno nevarno obliko raka ščitnice. Anaplastični karcinom ščitnice je eden najbolj agresivnih in smrtonosnih malignomov ščitnice, za katerega sta značilna hitra rast in odpornost na konvencionalno zdravljenje. Celice KMH-2 so bile pridobljene iz biopsije primarnega tumorja, preden je bolnik opravil kakršno koli kemoterapijo ali radioterapijo. Te celice so zelo pomembne za preučevanje patofiziologije ATC in preizkušanje učinkovitosti novih terapevtskih sredstev.

Celična linija KMH-2 ima pri gojenju in vitro morfologijo v obliki vretena, ki je značilna za številne celice anaplastičnega karcinoma ščitnice. Te celice so odporne na številna kemoterapevtska sredstva, vključno s cisplatinom, doksorubicinom, etopozidom in pepleomicinom, kar odraža klinični izziv zdravljenja ATC. Kemorezistenco celic KMH-2 pripisujejo izražanju mRNA proteina, povezanega z odpornostjo proti več zdravilom (MRP), čeprav ne izražajo mRNA mdr-1 in mdr-3, povezanih s P-glikoproteinom, kar nakazuje, da je njihov mehanizem odpornosti proti zdravilom neodvisen od P-glikoproteina. Zaradi te odpornosti na kemoterapijo je KMH-2 dragocen model za preučevanje alternativnih strategij zdravljenja.

Kar zadeva značilnosti rasti, imajo celice KMH-2 razmeroma dolg podvojitveni čas, njihova tumorogenost pa je bila potrjena v ksenotransplantacijskih modelih z uporabo athimskih golih miši. Vendar pa so te celice potrebovale posebne pogoje za povečanje razmnoževanja in vivo, kot je uporaba majhne plastične ploščice za lažjo rast po inokulaciji. Kromosomska analiza KMH-2 je razkrila številne nepravilnosti, kar je pogosta značilnost agresivnih rakov, kar še dodatno poudarja njihovo uporabnost pri preučevanju genetskih osnov anaplastičnega karcinoma ščitnice.

Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • KMHDASH2
  • KMH2

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Vretenaste celice z orjaškimi celicami
Čas podvojitve
58 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
KMH-2 (kataloška številka Cytion 305142)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_S641

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
71 let
Etnična pripadnost
Azijski