Pāriet uz saturu
KMH-2
Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
KMHDASH2, KMH2

Dokumenti

KMH-2

Cell line · Preces numurs 305142

KMH-2 ir cilvēka anaplastiskā vairogdziedzera karcinomas (ATC) šūnu līnija, kas iegūta no vīrieša pacienta ar strauji progresējošu un letālu vairogdziedzera vēža formu. Ana...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KMH-2 ir cilvēka anaplastiskās vairogdziedzera karcinomas (ATC) šūnu līnija, kas iegūta no vīrieša pacienta ar strauji progresējošu un letālu vairogdziedzera vēža formu. Anaplastiskā vairogdziedzera karcinoma ir viens no agresīvākajiem un letālākajiem vairogdziedzera ļaundabīgajiem audzējiem, kam raksturīga strauja augšana un rezistence pret tradicionālo terapiju. KMH-2 šūnas tika iegūtas no primārā audzēja biopsijas, pirms pacientam tika veikta ķīmijterapija vai staru terapija. Šīs šūnas ir ļoti noderīgas ATC patofizioloģijas izpētei, kā arī jaunu terapeitisko līdzekļu efektivitātes pārbaudei.

KMH-2 šūnu līnijai, kultivējot in vitro, piemīt vārpstas formas morfoloģija, kas raksturīga daudzām anaplastiskās vairogdziedzera karcinomas šūnām. Šīm šūnām ir konstatēta rezistence pret vairākiem ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem, tostarp cisplatīnu, doksorubicīnu, etopozīdu un pepleomicīnu, kas atspoguļo klīnisko izaicinājumu ATC ārstēšanā. KMH-2 šūnu ķīmorezistence ir saistīta ar multirezistences proteīna (MRP) mRNS ekspresiju, lai gan tās neekspresē mdr-1 un mdr-3 mRNS, kas saistītas ar P-glikoproteīnu, kas liecina, ka to rezistences pret zālēm mehānisms ir neatkarīgs no P-glikoproteīna. Šī rezistence pret ķīmijterapiju padara KMH-2 par vērtīgu modeli alternatīvu ārstēšanas stratēģiju izpētei.

Attiecībā uz augšanas īpašībām KMH-2 šūnām ir salīdzinoši ilgs dubultošanās laiks, un to audzēja aktivitāte ir apstiprināta ksenotransplantācijas modeļos, izmantojot athimiskās nude peles. Tomēr šīm šūnām bija nepieciešami īpaši apstākļi, lai veicinātu proliferāciju in vivo, piemēram, nelielas plastmasas plāksnītes izmantošana, lai veicinātu augšanu pēc inokulācijas. KMH-2 hromosomu analīze atklāja vairākas anomālijas, kas ir raksturīga agresīviem vēža veidiem, un tas vēl vairāk uzsver to lietderību anaplastiskās vairogdziedzera karcinomas ģenētisko pamatu pētniecībā.

Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • KMHDASH2
  • KMH2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Verpstas formas šūnas ar milzu šūnām
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
58 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KMH-2 (Cytion kataloga numurs 305142)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_S641

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
71 gads
Etniskā piederība
Āzijas