Siirry sisältöön
CHL
Kudos
Keuhkot
Synonyymit
Chinese Hamster Lung

Asiakirjat

CHL

Cell line · Tuotenumero 305013

The CHL (Chinese Hamster Lung) cell line is derived from the lung tissue of the Chinese hamster, Cricetulus griseus. This cell line is commonly used in bi...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CHL-solulinja (Chinese Hamster Lung) on peräisin kiinalaisen hamsterin (Cricetulus griseus) keuhkokudoksesta. Tätä solulinjaa käytetään yleisesti biolääketieteellisessä tutkimuksessa, koska se reagoi herkästi mutageeneihin ja soveltuu hyvin sytogeneettisiin testeihin, kuten in vitro -kromosomipoikkeavuustestiin. CHL-solulinja on osoittautunut erityisen hyödylliseksi geneettisessä toksikologiassa kemiallisten yhdisteiden potentiaalisen genotoksisuuden arvioinnissa. Sen genominen stabiilius ja suhteellisen korkea proliferaatioaste tekevät siitä sopivan mallin mutaatiomekanismien tutkimiseen ja erilaisten aineiden sytotoksisuuden arviointiin.

CHL-solut kasvavat yksikerroksisina ja ovat adheesiivisia, ja niiden morfologia on fibroblastien kaltainen. Ne ovat karyotyyppisesti urospuolisia, ja niitä on käytetty laajasti tutkimuksessa, joka vaatii nisäkäsjärjestelmää kemiallisten yhdisteiden metaboliseen aktivointiin. Solulinja tukee erilaisten virusten kasvua, ja siksi sitä käytetään myös virologisessa tutkimuksessa. On tärkeää ylläpitää niitä huolellisesti kontrolloiduissa olosuhteissa niiden ominaisuuksien muutosten estämiseksi ja kokeellisten tulosten toistettavuuden varmistamiseksi. CHL-solulinja on edelleen tärkeä resurssi toksikologian, farmakologian ja molekyylibiologian aloilla.

Kudos
Keuhkot
Synonyymit
  • Chinese Hamster Lung

02Luokittelu

Organismi
kiinalainen hamsteri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
CHL (Cytionin tuotenumero 305013)
NCBI-verotunnus
10029
Cellosaurus
CVCL_0212

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Ihmisen kudoksen plasminogeeniaktivaattori (T-PA)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.