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CHL
Tessuto
Polmone
Sinonimi
Chinese Hamster Lung

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CHL

Cell line · Codice prodotto 305013

The CHL (Chinese Hamster Lung) cell line is derived from the lung tissue of the Chinese hamster, Cricetulus griseus. This cell line is commonly used in bi...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CHL (Chinese Hamster Lung) deriva dal tessuto polmonare del criceto cinese, Cricetulus griseus. Questa linea cellulare è comunemente utilizzata nella ricerca biomedica per la sua sensibilità ai mutageni e la sua utilità nei test citogenetici, come il saggio di aberrazione cromosomica in vitro. La linea cellulare CHL si è dimostrata particolarmente utile in tossicologia genetica per valutare la potenziale genotossicità dei composti chimici. La sua stabilità genomica e il tasso di proliferazione relativamente elevato la rendono un modello adatto per studiare i meccanismi di mutazione e per valutare la citotossicità di varie sostanze.

Le cellule CHL crescono in un monostrato e sono aderenti, con una morfologia simile a quella dei fibroblasti. Sono cariotipicamente maschili e sono state ampiamente utilizzate nella ricerca che richiede un sistema mammifero per l'attivazione metabolica di composti chimici. La linea cellulare supporta la crescita di vari virus ed è quindi utilizzata anche nella ricerca virologica. È importante mantenerle in condizioni attentamente controllate per evitare cambiamenti nelle loro caratteristiche e per garantire la riproducibilità dei risultati sperimentali. La linea cellulare CHL continua a essere una risorsa fondamentale nei campi della tossicologia, della farmacologia e della biologia molecolare.

Tessuto
Polmone
Sinonimi
  • Chinese Hamster Lung

02Classificazione

Organismo
Criceto cinese
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CHL (numero di catalogo Cytion 305013)
Codice fiscale NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0212

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Attivatore del plasminogeno tissutale umano (T-Pa)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.