Pāriet uz saturu
CHL
Audums
Plaušas
Sinonīmi
Chinese Hamster Lung

Dokumenti

CHL

Cell line · Preces numurs 305013

The CHL (Chinese Hamster Lung) cell line is derived from the lung tissue of the Chinese hamster, Cricetulus griseus. This cell line is commonly used in bi...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CHL (Ķīniešu kāmja plaušu) šūnu līnija ir iegūta no ķīniešu kāmja (Cricetulus griseus) plaušu audiem. Šo šūnu līniju plaši izmanto biomedicīniskajos pētījumos, jo tā ir jutīga pret mutagēniem un noder citogenētiskajos testos, piemēram, in vitro hromosomu aberāciju testā. CHL šūnu līnija ir izrādījusies īpaši noderīga ģenētiskajā toksikoloģijā, novērtējot ķīmisko savienojumu potenciālo genotoksicitāti. Tās genomiskā stabilitāte un salīdzinoši augstais proliferācijas ātrums padara to par piemērotu modeli mutāciju mehānismu izpētei un dažādu vielu citotoksicitātes novērtēšanai.

CHL šūnas aug monoslānī un ir adhezīvas, ar fibroblastu līdzīgu morfoloģiju. Tās ir kariotipiski vīriešu dzimuma un ir plaši izmantotas pētījumos, kuros nepieciešama zīdītāju sistēma ķīmisko savienojumu metaboliskai aktivācijai. Šūnu līnija atbalsta dažādu vīrusu augšanu un tādēļ tiek izmantota arī viroloģijas pētījumos. Ir svarīgi tās uzturēt rūpīgi kontrolētos apstākļos, lai novērstu to īpašību izmaiņas un nodrošinātu eksperimentālo rezultātu reproducējamību. CHL šūnu līnija joprojām ir būtisks resurss toksikoloģijas, farmakoloģijas un molekulārās bioloģijas jomās.

Audums
Plaušas
Sinonīmi
  • Chinese Hamster Lung

02Klasifikācija

Organisms
Ķīniešu kāmītis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
CHL (Cytion kataloga numurs 305013)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10029
Cellosaurus
CVCL_0212

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Cilvēka audu plazminogēna aktivators (T-PA)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.