Siirry sisältöön
EL4
Kudos
Askites
Sairaus
Hiiren T-solujen esiaste T-solulymfoblastinen lymfooma/leukemia
Synonyymit
EL-4, EL 4, E.L.4

Asiakirjat

EL4

Cell line · Tuotenumero 300653

The EL4 cell line is derived from a lymphoma of a mouse and is extensively used in immunology and cancer research. These cells originate from a thymoma, a...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

EL4-solulinja on peräisin hiiren lymfoomasta, ja sitä käytetään laajalti immunologian ja syövän tutkimuksessa. Nämä solut ovat peräisin kateenkorvan epiteelisoluista peräisin olevasta kateenkorvan epiteelisolujen kasvaintyypistä, ja ne toimivat mallina T-solulymfoomien ja immuunivasteen tutkimisessa. EL4-solut ovat arvokkaita tutkittaessa T-solujen kehittymisen, aktivoitumisen ja signaloinnin mekanismeja sekä kasvainsolujen ja immuunijärjestelmän välistä vuorovaikutusta. Lymfaattisen alkuperänsä vuoksi EL4-soluja käytetään myös tutkimuksessa, jossa keskitytään immuniteetin säätelyn kannalta kriittisten sytokiinien tuotantoon ja toimintaan.

EL4-soluilla on lymfoblastinen morfologia ja ne ilmentävät T-soluille tyypillisiä merkkiaineita, kuten CD3:a ja T-solureseptorikomplekseja. Ne reagoivat hyvin herkästi erilaisiin T-soluja aktivoiviin ärsykkeisiin, minkä vuoksi ne soveltuvat T-solureseptorin signaalireittejä ja immunomoduloivien aineiden vaikutuksia koskeviin tutkimuksiin. Lisäksi EL4-soluja käytetään kasvainimmunologiassa syöpäsolujen ja immuunijärjestelmän välisten vuorovaikutusten tutkimiseen, mikä auttaa T-solulymfoomien ja muiden syöpien immunoterapioiden kehittämisessä. EL4-solujen kyky tuottaa suuria määriä tiettyjä sytokiineja, kuten interleukiini-2:ta (IL-2), tekee niistä hyödyllisen välineen sekä perustutkimuksessa että immuunivasteisiin kohdistuvien terapeuttisten strategioiden kehittämisessä.

Kudos
Askites
Sairaus
Hiiren T-solujen esiaste T-solulymfoblastinen lymfooma/leukemia
Sovellukset
Syöpätutkimus, 3D-soluviljely, Immunologia
Synonyymit
  • EL-4
  • EL 4
  • E.L.4

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit
Solutyyppi
T-lymfoblasti
Karyotyyppi
Modaaliluku = 39

04Tunnisteet

Lähdeviite
EL4 (Cytionin luettelonumero 300653)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0255

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2b, Thy-1.2
Virukset
MLV +, negatiivinen ectromelia-virukselle (hiiren rokolle)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Suspension solut: Poista solut alustasta pipetoimalla tuoreeseen väliaineeseen. Yksittäisten solujen saamiseksi suspensio ohjataan useita kertoja 22-ulotteisen neulan läpi ja annostellaan uusiin pulloihin. Kasvatus kollageenin päällä: Käytetään seuraavaa standardiprotokollaa tarttuvien solujen poistamiseksi. Poistetaan väliaine ja huuhdellaan kiinni olevat solut PBS:llä, jossa ei ole kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml PBS:ää T25-soluviljelypulloissa, 5-10 ml T75-soluviljelypulloissa). Lisää TrypleExpressiä (1-2 ml T25-soluviljelypulloa kohti, 2,5 ml T75-soluviljelypulloa kohti), solulevyn on peitettävä kokonaan. Inkuboidaan 37 asteessa 10 minuuttia. Resuspendoi solut varovasti, väliaineen lisääminen on vapaaehtoista, mutta ei välttämätöntä, ja annostele ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6N
Luovuttajan ikä
Määrittelemätön