Pāriet uz saturu
EL4
Audums
Ascīts
Slimība
Peles T šūnu prekursoru limfoblastiskā limfoma/leikēmija
Sinonīmi
EL-4, EL 4, E.L.4

Dokumenti

EL4

Cell line · Preces numurs 300653

The EL4 cell line is derived from a lymphoma of a mouse and is extensively used in immunology and cancer research. These cells originate from a thymoma, a...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

EL4 šūnu līnija ir iegūta no peles limfomas un tiek plaši izmantota imunoloģijā un vēža pētījumos. Šo šūnu izcelsme ir timoma, kas ir audzēja veids, kurš veidojas no limfomas epitēlija šūnām, un tās kalpo kā modelis T šūnu limfomu un imūnās atbildes reakcijas izpētei. EL4 šūnas ir vērtīgas, lai pētītu T šūnu attīstības, aktivizācijas un signalizācijas mehānismus, kā arī audzēja šūnu un imūnsistēmas mijiedarbību. Limfoīdās izcelsmes dēļ EL4 šūnas tiek izmantotas arī pētījumos, kas vērsti uz citokīnu, kuri ir ļoti svarīgi imūnsistēmas regulēšanai, ražošanu un darbību.

EL4 šūnām ir limfoblastiska morfoloģija, un tās ekspresē T-šūnām raksturīgos marķierus, piemēram, CD3 un T-šūnu receptoru kompleksus. Tās ir ļoti jutīgas pret dažādiem stimuliem, kas aktivizē T-šūnas, tāpēc tās ir piemērotas T-šūnu receptoru signalizācijas ceļu un imūnmodulatoru iedarbības pētījumiem. Turklāt EL4 šūnas izmanto audzēju imunoloģijā, lai pētītu vēža šūnu un imūnsistēmas mijiedarbību, palīdzot izstrādāt T šūnu limfomu un citu vēža veidu imūnterapiju. EL4 šūnu spēja ražot lielu daudzumu specifisku citokīnu, piemēram, interleikīnu-2 (IL-2), padara tās par noderīgu instrumentu gan fundamentālajos pētījumos, gan terapeitisko stratēģiju izstrādē, kas vērstas uz imūnās atbildes reakcijas novēršanu.

Audums
Ascīts
Slimība
Peles T šūnu prekursoru limfoblastiskā limfoma/leikēmija
Pieteikumi
Imunoloģija, 3D šūnu kultūras, Vēža pētījumi, 3D šūnu kultūras
Sinonīmi
  • EL-4
  • EL 4
  • E.L.4

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts
Šūnu tips
T limfoblasts
Kariotips
Modālais numurs = 39

04Identifikatori

Atsauce
EL4 (Cytion kataloga numurs 300653)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0255

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2b, Thy-1.2
Vīrusi
MLV +, negatīvs attiecībā uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakas)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Suspensijas šūnas: Atdaliet šūnas no substrāta, pipetējot ar svaigu barotni. Lai iegūtu atsevišķas šūnas, suspensiju vairākas reizes izlaiž caur 22 collu adatu un iepilda jaunās kolbās. Audzēšana uz kolagēna: Lai atdalītu pielipušās šūnas, izmantot šādu standarta protokolu. Noņemt barotni un izskalot pielipušās šūnas, izmantojot PBS bez kalcija un magnija (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 šūnu kultūru kolbām). Pievienojiet TrypleExpress (1-2 ml uz T25, 2,5 ml uz T75 šūnu kultūru kolbu), šūnu sloksnei jābūt pilnībā pārklātai. Inkubēt 10 minūtes 37 °C temperatūrā. Uzmanīgi resuspendējiet šūnas, barotnes pievienošana nav obligāta, bet nav nepieciešama, un izlejiet jaunās kolbās, kurās ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6N
Donora vecums
Nav norādīts