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C8-D1A
Tissu
Cerveau
Synonymes
C8D1A, Astrocyte type I clone

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C8-D1A

Cell line · Référence du produit 300316

La lignée cellulaire C8-D1A est une lignée d'astrocytes issue du cortex cérébral d'une souris C57BL/6 âgée de 8 jours. Cette lignée cellulaire est largement utilisée en neuro...

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  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire C8-D1A est une lignée cellulaire astrocytaire dérivée du cortex cérébral d'une souris C57BL/6 âgée de 8 jours. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la recherche neurobiologique en raison de ses propriétés astrocytaires robustes, qui en font un modèle représentatif pour l'étude de divers aspects de la fonction astrocytaire et des interactions entre les neurones et la glie. Les cellules C8-D1A expriment la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), une protéine de filament intermédiaire caractéristique des astrocytes matures, indiquant leur état différencié et leur lignée astrocytaire.

La recherche utilisant la lignée cellulaire C8-D1A a contribué de manière significative à la compréhension des réponses neuroinflammatoires, de la formation de cicatrices gliales et du rôle des astrocytes dans la régulation des neurotransmetteurs et le maintien des synapses. Ces cellules offrent un environnement in vitro cohérent et contrôlé pour disséquer les voies moléculaires impliquées dans la neurodégénérescence, les lésions du SNC et la neuroprotection médiée par les astrocytes. Leur utilité dans les essais liés à la découverte de médicaments, en particulier pour les troubles neurologiques, souligne leur importance dans les processus de développement thérapeutique.

Tissu
Cerveau
Applications
culture cellulaire 3D, Neurosciences
Synonymes
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Neurones
Type de cellule
Astrocyte
Statut de ploïdie
Pseudodiploïde

04Identifiants

Référence
C8-D1A (numéro de catalogue Cytion 300316)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
C57BL/6
Âge du donneur
8 jours