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C8-D1A
Pañuelo de papel
Cerebro
Sinónimos
C8D1A, Astrocyte type I clone

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C8-D1A

Cell line · Número de producto 300316

La línea celular C8-D1A es una línea de astrocitos derivada de la corteza cerebral de un ratón C57BL/6 de 8 días de edad. Esta línea celular se utiliza ampliamente en neuro...

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01Información general

Descripción

La línea celular C8-D1A es una línea celular astrocítica derivada de la corteza cerebral de un ratón C57BL/6 de 8 días de edad. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación neurobiológica debido a sus robustas propiedades astrocíticas, que la convierten en un modelo representativo para estudiar diversos aspectos de la función astrocítica y las interacciones neurona-glía. Las células C8-D1A expresan la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), una proteína de filamento intermedio característica de los astrocitos maduros, lo que indica su estado diferenciado y su linaje astrocítico.

La investigación con la línea celular C8-D1A ha contribuido significativamente a comprender las respuestas neuroinflamatorias, la formación de cicatrices gliales y el papel de los astrocitos en la regulación de los neurotransmisores y el mantenimiento sináptico. Estas células proporcionan un entorno in vitro consistente y controlado para diseccionar las vías moleculares implicadas en la neurodegeneración, las lesiones del SNC y la neuroprotección mediada por astrocitos. Su utilidad en ensayos relacionados con el descubrimiento de fármacos, especialmente para trastornos neurológicos, subraya su importancia en los procesos de desarrollo terapéutico.

Pañuelo de papel
Cerebro
Aplicaciones
cultivo celular 3D, Neurociencia
Sinónimos
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Neuronal
Tipo de célula
Astrocitos
Estado de ploidía
Pseudodiploide

04Identificadores

Referencia
C8-D1A (número de catálogo 300316 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Raza / subespecie
C57BL/6
Edad del donante
8 días