Pāriet uz saturu
C8-D1A
Audums
Smadzenes
Sinonīmi
C8D1A, Astrocyte type I clone

Dokumenti

C8-D1A

Cell line · Preces numurs 300316

C8-D1A šūnu līnija ir astrocītu šūnu līnija, kas iegūta no 8 dienas vecas C57BL/6 peles smadzeņu garozas. Šo šūnu līniju plaši izmanto neiro...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C8-D1A šūnu līnija ir astrocītu šūnu līnija, kas iegūta no 8 dienas vecas C57BL/6 peles smadzeņu garozas. Šo šūnu līniju plaši izmanto neirobioloģiskajos pētījumos, jo tai piemīt spēcīgas astrocītu īpašības, kas padara to par reprezentatīvu modeli dažādu astrocītu funkciju un neironu un glijas mijiedarbības aspektu izpētei. C8-D1A šūnas ekspresē gliālo fibrilāro skābo proteīnu (GFAP), kas ir nobriedušu astrocītu starpfilamentu proteīns, norādot uz to diferencēto stāvokli un astrocītu līniju.

Pētījumi, kuros izmantota C8-D1A šūnu līnija, ir būtiski veicinājuši izpratni par neiroiekaisuma reakcijām, glijas rētaudu veidošanos un astrocītu lomu neirotransmiteru regulēšanā un sinaptikas uzturēšanā. Šīs šūnas nodrošina konsekventu un kontrolētu in vitro vidi, lai pētītu molekulāros ceļus, kas saistīti ar neirodeģenerāciju, CNS traumām un astrocītu mediētu neiroprotektīvo aizsardzību. To lietderība testos, kas saistīti ar zāļu atklāšanu, jo īpaši attiecībā uz neiroloģiskiem traucējumiem, uzsver to nozīmi terapijas izstrādes procesos.

Audums
Smadzenes
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, neirozinātne
Sinonīmi
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Neironu
Šūnu tips
Astrocīti
Ploidijas statuss
Pseidodiploīdi

04Identifikatori

Atsauce
C8-D1A (Cytion kataloga numurs 300316)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6
Donora vecums
8 dienas