Mine otse sisu juurde
C8-D1A
Kude
Aju
Sünonüümid
C8D1A, Astrocyte type I clone

Dokumendid

C8-D1A

Cell line · Toote number 300316

Rakuliin C8-D1A on astrotsüütide rakuliin, mis on saadud 8-päevase C57BL/6 hiire ajukoorest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt neuro...

€500.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C8-D1A rakuliin on astrotsüütide rakuliin, mis on saadud 8 päeva vanuse C57BL/6 hiire ajukoorest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt neurobioloogilistes uuringutes tänu selle tugevatele astrotsüütilistele omadustele, mis muudavad selle esinduslikuks mudeliks astrotsüütide funktsiooni ja neuronite ja glia interaktsioonide erinevate aspektide uurimiseks. C8-D1A rakud ekspresseerivad gliaalset fibrillaarset happelist valku (GFAP), mis on küpsete astrotsüütide iseloomulik vahefilamentide valk, mis näitab nende diferentseeritud seisundit ja astrotsüütilist päritolu.

C8-D1A rakuliini kasutavad uuringud on aidanud oluliselt kaasa neuroinflammatoorsete reaktsioonide, gliaarmide moodustumise ja astrotsüütide rolli mõistmisele neurotransmitterite reguleerimisel ja sünapsi säilitamisel. Need rakud pakuvad järjepidevat ja kontrollitud in vitro keskkonda neurodegeneratsiooni, kesknärvisüsteemi vigastuste ja astrotsüütide poolt vahendatud neuroprotektsiooni molekulaarsete radade uurimiseks. Nende kasulikkus ravimite avastamisega seotud katsetes, eriti neuroloogiliste häirete puhul, rõhutab nende tähtsust ravimiarendusprotsessis.

Kude
Aju
Rakendused
3D rakukultuur, neuroteadus
Sünonüümid
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Neuronaalne
Rakutüüp
Astrotsüüdid
Ploidsus
Pseudodiploid

04Tunnused

Viide
C8-D1A (Cytioni katalooginumber 300316)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6
Doonori vanus
8 päeva