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C8-D1A
Tessuto
Cervello
Sinonimi
C8D1A, Astrocyte type I clone

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C8-D1A

Cell line · Codice prodotto 300316

La linea cellulare C8-D1A è una linea di astrociti derivata dalla corteccia cerebrale di un topo C57BL/6 di 8 giorni di età. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata in neuro...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare C8-D1A è una linea cellulare astrocitaria derivata dalla corteccia cerebrale di un topo C57BL/6 di 8 giorni. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca neurobiologica grazie alle sue robuste proprietà astrocitarie, che la rendono un modello rappresentativo per lo studio di vari aspetti della funzione astrocitaria e delle interazioni neurone-glia. Le cellule C8-D1A esprimono la proteina gliale fibrillare acida (GFAP), una proteina del filamento intermedio caratteristica degli astrociti maturi, che indica il loro stato differenziato e il loro lignaggio astrocitario.

La ricerca che utilizza la linea cellulare C8-D1A ha contribuito in modo significativo alla comprensione delle risposte neuroinfiammatorie, della formazione di cicatrici gliali e del ruolo degli astrociti nella regolazione dei neurotrasmettitori e nel mantenimento delle sinapsi. Queste cellule forniscono un ambiente in vitro coerente e controllato per la dissezione delle vie molecolari coinvolte nella neurodegenerazione, nelle lesioni del SNC e nella neuroprotezione mediata dagli astrociti. La loro utilità nei saggi relativi alla scoperta di farmaci, in particolare per i disturbi neurologici, sottolinea la loro importanza nei processi di sviluppo terapeutico.

Tessuto
Cervello
Applicazioni
coltura cellulare 3D, Neuroscienze
Sinonimi
  • C8D1A
  • Astrocyte type I clone

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Neuronale
Tipo di cellula
Astrociti
Stato di ploidia
Pseudodiploide

04Identificatori

Riferimento bibliografico
C8-D1A (numero di catalogo Cytion 300316)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6379

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
8 giorni